1.抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
2.結(jié)合在固相載體表面a的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
3. 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。
4.受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結(jié)合在固相載體上。
5. 此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
6.加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復性好。以免疫學反應為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。