兔黑色素瘤關(guān)聯(lián)ME20 （ME20M）試劑盒操作說(shuō)明

11月立冬如期蒞臨，讓季節(jié)抖落了一身的秋意，把秋風(fēng)的高爽變成北風(fēng)的怒號(hào)，尖聲地驚叫著，掠過(guò)樹(shù)梢，拍打著屋脊和窗戶(hù)。小雪用節(jié)氣的魔手截住了雨點(diǎn)，把它變成了晶瑩剔透的六瓣雪花，讓她以飛舞的姿勢(shì)闖入季節(jié)的座位，抒寫(xiě)冬天的童話(huà)。接下來(lái)介紹 兔黑色素瘤關(guān)聯(lián)ME20 （ME20M）試劑盒操作說(shuō)明

雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原):

1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過(guò)夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。

2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。

3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。

4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml

6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀(guān)察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。