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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第11年

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P19小鼠畸胎瘤細(xì)胞

參  考  價(jià):1500
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號(hào)

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    經(jīng)銷商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

1×106 1500元 15瓶可售

更新時(shí)間:2023-11-13 14:59:22瀏覽次數(shù):245次

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貨號(hào) A01X1093 規(guī)格 1×106
英文名稱 P19細(xì)胞 產(chǎn)品分類 小鼠細(xì)胞系
實(shí)驗(yàn)類型 MEMα+7.5%小牛血清+2.5%胎牛血清+1%P/S 報(bào)告 (STR鼠源鑒定)報(bào)告
P19小鼠畸胎瘤細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品: P19小鼠畸胎瘤細(xì)胞 P19細(xì)胞 P1HTR細(xì)胞 P1HTR;P1HTR P30/OHK細(xì)胞 P30/OHK;P30OHK P31/FUJ細(xì)胞 P31/FUJ;P31FUJ P388D1小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞 P388D1細(xì)胞

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

名稱

P19 [P-19] (小鼠畸胎瘤細(xì)胞) (種屬鑒定正確)

別稱

P-19

種屬

小鼠

年齡(性別)

雄性

組織來(lái)源

胚胎;畸胎癌

生長(zhǎng)特性

貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)

上皮細(xì)胞樣

背景描述

P19細(xì)胞是從C3H/He小鼠中誘導(dǎo)的畸胎癌中建立的;P19細(xì)胞在含有0.1mMβ-巰基乙醇的培養(yǎng)基中克隆的效率高。細(xì)胞具有多能性:在500nM維生素-A酸誘導(dǎo)下,細(xì)胞可以分化成神經(jīng)樣和神經(jīng)膠質(zhì)樣細(xì)胞;在0.5%-1.0%二甲亞砜(DMSO)存在下,細(xì)胞分化形成心臟和骨骼肌樣基質(zhì),但不形成神經(jīng)樣或神經(jīng)膠質(zhì)樣細(xì)胞。在DMSO和維生素-A酸同時(shí)存在時(shí),細(xì)胞的分化與只有維生素-A酸一樣。

生物安全等級(jí)

1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基

MEMα+7.5% CS+2.5% FBS+1% P/S

推薦傳代比例

1:3-1:4

推薦換液頻率

2~3次/周

倍增時(shí)間

~48-72小時(shí)

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO     溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%     溫度:37℃

保藏機(jī)構(gòu)

ATCC; CRL-1825 DSMZ; ACC-316 ECACC; 95102107

細(xì)胞傳代:

1. P19小鼠畸胎瘤細(xì)胞試驗(yàn)準(zhǔn)備:200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌),酒精棉球,廢液缸,試管架,微量移液器,記號(hào)筆,培養(yǎng)皿,離心管。

2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基,用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。

3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液,消化 1 分鐘(37℃,5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁,觀察到細(xì)胞從壁上脫落下來(lái)為止。

4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)。

5. 用 Tip 頭多次吹吸,使細(xì)胞分散開。

6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中,1000rpm 離心 5min。

7. 用培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,細(xì)胞計(jì)數(shù)后選擇 0.8X106 個(gè)細(xì)胞加入一個(gè) 35mm 培養(yǎng)皿。

8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中,混勻細(xì)胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中,使其均勻分布。

9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),第二天轉(zhuǎn)染。

5.jpg

8.jpg


細(xì)胞轉(zhuǎn)染:

1. 轉(zhuǎn)染試劑的準(zhǔn)備

① 將 400ul 去核酸酶水加入管中,震蕩 10 秒鐘,溶解脂狀物。

② 震蕩后將試劑放在-20 攝氏度保存,使用前還需震蕩。

2. 選擇合適的混合比例(1:1-1:2/脂質(zhì)體體積:DNA 質(zhì)量)來(lái)轉(zhuǎn)染細(xì)胞。在一個(gè)轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無(wú)血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA,震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑,再次震蕩。

9號(hào)染色體開放閱讀框156封閉多肽

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細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作:
①進(jìn)無(wú)菌室前要洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動(dòng)作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過(guò)燒灼進(jìn)行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長(zhǎng)時(shí)間燒灼,以防退火;燒過(guò)的器械要冷卻后才能使用;已吸過(guò)培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì),吸管再用時(shí)會(huì)將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過(guò)火焰是也不能時(shí)間太長(zhǎng),以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細(xì)胞,同時(shí)塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會(huì)產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過(guò)早開瓶,開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位,避免直立,以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過(guò)早暴露在空氣中。
④操作時(shí)盡量不要談話,咳嗽以防止來(lái)自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時(shí),應(yīng)專管專用,一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去,以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺(tái)面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺(tái)面;防止細(xì)胞交叉污染:所有從別處轉(zhuǎn)來(lái)的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲(chǔ)備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定,如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變,可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。

 


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