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ELISA實驗時必須注意的十個問題

時間:2021/8/11閱讀:457
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   ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來,發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學和醫(yī)學科學的許多領域。然而,我們經(jīng)常會在elisa實驗中出現(xiàn)各種問題,如果能提前知道一些關于elisa實驗的要領就可以正確的避免這些問題的出現(xiàn),現(xiàn)在總結了十個關于elisa實驗中需要注意的問題:

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1、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M行確定。但需要有專業(yè)人員進行矯正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩(wěn)定。
4、實驗時,要使底物避光保存。
5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
7、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
8、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
9、應盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數(shù)據(jù)的準確性。
10、對結果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。

   



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