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DAB染色液的使用方法

時(shí)間:2022/4/2閱讀:1564
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DAB染色液的使用方法:

1.DAB顯色液配制 10mM Tris-HCl (pH7.6)   9mL  +DAB (diaminobezidin 3,3-二氨基聯(lián)苯胺) +0.3%(W/V)  NiCl2 或CoCl2   1mL ,顯色時(shí)加入5-10mL 30%H2O2 混勻后立即使用  

2. 顯色 準(zhǔn)備好含有待測(cè)蛋白的固相膜:包括電泳、轉(zhuǎn)印、封阻、一抗(或生物su)處理、辣根過(guò)氧化酶(HRP)標(biāo)記的二抗(或鏈霉親和素)處理、清洗等步驟。  

3.加入適量的DAB顯色液,鋪滿整個(gè)固相膜表面(可按比例增減)。  

4. 置于平式搖蕩儀上,在室溫下孵育2至5分 鐘,避免光照(暗室操作),直至棕褐色沉淀出現(xiàn)。  

5.用鑷子夾起固相膜,放進(jìn)無(wú)離子水里清洗。   

6.空氣中晾干。   

7. 拍照記錄 。 


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