一抗選擇重點(diǎn)需確定的五點(diǎn):

1、確定抗體的名字。

注意中英文名字、它名、亞型等信息。

2、確定你的實(shí)驗(yàn)類型。

Elisa，WB，IHC，ICC，還是FACS。一般抗體的說明書都會(huì)列出該抗體經(jīng)驗(yàn)證過適用于何種實(shí)驗(yàn)的類型，如果抗體說明書沒有提及的應(yīng)用類型，并不意味著該抗體不適用于此種分析應(yīng)用類型，而僅是說明尚未經(jīng)過此種實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，請(qǐng)根據(jù)說明書列出的已驗(yàn)證的類型來選擇適合你實(shí)驗(yàn)的抗體。

3、確定實(shí)驗(yàn)樣本的種屬。

Human，Mouse，還是Rat。一般抗體說明書都列出該抗體經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證過適用于何種物種實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)根據(jù)說明書列出已驗(yàn)證的種屬來選擇適合你實(shí)驗(yàn)的抗體。

4、樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)。

了解樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)有助于選擇最合適的抗體，待測(cè)樣本蛋白的結(jié)構(gòu)域和樣本在提取和處理過程中是否會(huì)變性，蛋白空間構(gòu)象的改變，會(huì)影響抗體的免疫親和反應(yīng)。

5、單多克隆抗體的選擇。

市面上的抗體還是以多克隆抗體為主，一般單克隆抗體特異性強(qiáng)，但親和力相對(duì)小，檢測(cè)抗原靈敏度相對(duì)就低;而多克隆抗體特異性稍弱，但抗體的親和力強(qiáng)，靈敏度高，但易出現(xiàn)非特異性染色(可以通過封閉等避免)。