一、反應(yīng)物自身的因素

1.抗體：

不同來源的抗體，反應(yīng)性各有差異，抗體的濃度、特異性和親和力都影響抗體抗原反應(yīng)，為提高試驗的可靠性，應(yīng)選擇高特異性、高親和力的抗體作診斷試劑。等價帶的寬窄也影響抗原抗體復合物的形成，單克隆抗體不適用于沉淀反應(yīng)。

2.抗原：

抗原的理化性狀、分子量、抗原決定簇的種類及數(shù)目均可影響反應(yīng)結(jié)果。顆粒性抗原出現(xiàn)凝集反應(yīng)，可溶性抗原出現(xiàn)沉淀反應(yīng)，單價抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象。

二、反應(yīng)環(huán)境條件

1.電解質(zhì)：

抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合后，雖由親水膠體變?yōu)槭杷z體，若溶液中無電解質(zhì)參加，仍不出現(xiàn)可見反應(yīng)。為了促成沉淀物或凝集物的形成，常用0.85%NaCl或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液。

2.酸堿度：

抗原抗體反應(yīng)必須在合適的pH環(huán)境中進行。蛋白質(zhì)具有兩性電離性質(zhì)，因此每種蛋白質(zhì)都有固定的等電點。抗原抗體反應(yīng)一般在pH6～9進行，有補體參與的反應(yīng)pH為7.2～7.4，pH過高或過低都將影響抗原與抗體反應(yīng)。

3.溫度：

在一定范圍內(nèi)，溫度升高可加速分子運動，抗原與抗體碰撞機會增多，使反應(yīng)加速。一般為15℃～40℃，常用的抗原抗體反應(yīng)溫度為37℃，溫度如高于56℃，可導致已結(jié)合的抗原抗體再解離，甚至變性或破壞。每種試驗都有其獨te的最適反應(yīng)溫度要求。此外，適當振蕩也可促進抗原抗體分子的接觸，加速反應(yīng)。