大鼠ELISA實驗忘加終止液？這些補救辦法要掌握

時間：2026/1/14閱讀：176

在大鼠ELISA實驗中，終止液（通常為2mol/L H?SO?）的作用是通過強酸性環(huán)境破壞辣根過氧化物酶（HRP）的活性，從而立即停止TMB底物的顯色反應(yīng)。若漏加終止液，酶促反應(yīng)將繼續(xù)，藍色會持續(xù)加深，吸光度（OD值）不斷上升，嚴重影響定量準(zhǔn)確性。

建議

立即行動：一旦發(fā)現(xiàn)漏加，應(yīng)第一時間補加終止液并讀數(shù)。

記錄異常：在實驗記錄中標(biāo)明“漏加終止液，于XX分鐘后補加"，便于后續(xù)數(shù)據(jù)分析和復(fù)現(xiàn)實驗。

預(yù)防為主：使用標(biāo)準(zhǔn)化操作流程（SOP）或排槍配合多通道移液器，減少人為失誤。

常見錯誤與注意事項：

不能跳過終止步驟：有文獻指出部分ELISA可在不加終止液的情況下直接讀數(shù)，但這需嚴格控制時間且波長不同（終止前~650nm，終止后~450nm），常規(guī)檢測必須加終止液以穩(wěn)定顏色并轉(zhuǎn)換至標(biāo)準(zhǔn)波長。

洗板無法替代終止：洗滌只能去除游離成分，不能滅活已結(jié)合的HRP酶，反應(yīng)仍會繼續(xù)。

安全操作：補加時避免產(chǎn)生氣泡，使用一次性吸頭防止交叉污染。

漏加終止液的影響與補救策略

影響階段	是否可補救	補救方法
剛發(fā)現(xiàn)漏加，顯色仍在進行中	? 可補救	立即每孔加入50μl終止液，混勻后馬上測定OD值（450nm）
已超過推薦讀數(shù)時間（如>15分鐘），但顏色未明顯褪去	部分有效	補加終止液后立即讀數(shù)，并在結(jié)果分析時注明“延遲終止"，謹慎解讀
顯色已長時間未終止，TMB可能已降解或沉淀	? 難以補救	數(shù)據(jù)不可靠，建議重做實驗

沈樵综合在线,一区二区三区乱码,免费资源一区二区三区,91超碰碰,av极品一线天,日韩免费高清一区二区,国产蜜尤福利在线,嗯啊91在线观看,精品一区二三

大鼠ELISA實驗忘加終止液？這些補救辦法要掌握

會員登錄

收藏該商鋪

提示

沈樵综合在线,一区二区三区乱码,免费资源一区二区三区,91超碰碰,av极品一线天,日韩免费高清一区二区,国产蜜尤福利在线,嗯啊91在线观看,精品一区二三

大鼠ELISA實驗忘加終止液？這些補救辦法要掌握

會員登錄

收藏該商鋪

提示

大鼠ELISA實驗忘加終止液？這些補救辦法要掌握