免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹：

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抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)?？贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或*從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
鈉鈣交換蛋白2多克隆抗體100µl　NAC2 Polyclonal Antibody

母系蛋白4多克隆抗體100 ul　MATN4 Polyclonal Antibody

母系蛋白3多克隆抗體100 ul　MATN3 Polyclonal Antibody

母系蛋白2多克隆抗體20 ul　MATN2 Polyclonal Antibody

母親DPP同源物7多克隆抗體100 ul　SMAD7 Polyclonal Antibody

母親DPP同源物3(磷酸化-Ser213)多克隆抗體100 ul　Smad3 (Phospho-Ser213) Polyclonal Antibody

母親DPP同源物3多克隆抗體20 ul　Smad3 Polyclonal Antibody

母親DPP同源物1/5/9多克隆抗體100 ul　Smad1/5/9 Polyclonal Antibody

母親DPP同源物1多克隆抗體100 ul　SMAD1 Polyclonal Antibody

膜型卷曲相關(guān)蛋白MFRP多克隆抗體100 ul　MFRP Polyclonal Antibody

膜聯(lián)蛋白X多克隆抗體100 ul　Annexin X Polyclonal Antibody

膜聯(lián)蛋白VI多克隆抗體100 ul　Annexin VI Polyclonal Antibody

膜聯(lián)蛋白III多克隆抗體20 ul　Annexin III Polyclonal Antibody

膜聯(lián)蛋白II多克隆抗體100 ul　Annexin II Polyclonal Antibody

膜聯(lián)蛋白I多克隆抗體100µl　Annexin I Polyclonal Antibody
乙酰輔酶A?；D(zhuǎn)移酶1抗體斜頂菌Drechslera leersiae (Atkinson) Subramanian ..匍枝根霉

相思根瘤菌Streptomyces griseomycini (Preobrazhenskaya ..聚多曲霉（薩氏曲霉）

聚貪氏菌frozen鏈格孢

枯草芽孢桿菌Staphylococcus epidermidis (Winslow and Win ..米根霉

NocardioidesSaccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..淡紫色擬青霉

非脫羧勒克菌Fusarium concolor Reinking, anamorph光孢短柄帚霉

枯草芽孢桿菌Meyerozyma guilliermondii (Wickerham) Kurtz ..香蕉炭疽盤長孢菌

球孢白僵菌Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..許旺酵母