實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    前列腺癌細胞：DU 145 

別稱DU-145; Du-145; DU 145; DU_145; Duke University 145

種屬人類

年齡（性別）男性，69歲

組織來源前列腺；轉(zhuǎn)移灶；腦癌

生長特性貼壁細胞

細胞形態(tài)上皮細胞樣

背景描述DU 145細胞是從一位有3年淋巴細胞白血病史的前列腺癌患者的腦部轉(zhuǎn)移病灶損害中建株的。DU 145細胞和從軟瓊脂中分離到的細胞不具有可檢測的激素敏感性，酸性磷酸酶呈弱陽性。對DU 145細胞及原始腫瘤細胞的亞顯微結(jié)構(gòu)分析可見微絨毛，微絲及細胞橋粒，有許多線粒體，發(fā)育良好高爾基體和異質(zhì)溶酶體。DU 145細胞不表達前列腺抗體。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基MEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

倍增時間~30-40小時

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性Yes, in nude mice; forms adenocarcinoma (grade II) consistent with prostatic primary.

抗原表達情況Blood Type O; Rh+

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。

大鼠 APPBP2 基因全長ORF克隆

大鼠 HSPA8 基因全長ORF克隆

大鼠 ECM1 基因全長ORF克隆

大鼠 RPAP3 基因全長ORF克隆

大鼠 TMEM130 基因全長ORF克隆

大鼠 CDC6 基因全長ORF克隆

大鼠 ANKRD46 基因全長ORF克隆

大鼠 HAUS3 基因全長ORF克隆

大鼠 PKM 基因全長ORF克隆

大鼠 BCAP29 基因全長ORF克隆

前列腺癌細胞：DU 145 50T 柯薩奇病毒A24型PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存

100g 硫酸銨 Ammonium Sulfate 室溫保存

2 ug pECFP- ER pECFP- ER 低溫運輸，-20℃保存

大腸桿菌O157檢驗培養(yǎng)基  

5mL 平滑肌細胞生長因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存

2 ug pMT21 pMT21 低溫運輸，-20℃保存

微生物學(xué)接種體肉湯 Micro Inoculum Broth 250g

PADI4  關(guān)節(jié)相關(guān)基因抗體 規(guī)格: 0.2ml

2 ug pGL4.30[Luc2P/NFAT-RE/Hygro] pGL4.30[Luc2P/NFAT-RE/Hygro] 低溫運輸，-20℃保存

CTLA-4/CD152  細胞毒性T細胞抗原-4抗體 規(guī)格: 0.2ml

ZNF23  鋅指蛋白23抗體 規(guī)格: 0.2ml

CD10/CALLA/Neprilysin  CD10抗體 規(guī)格: 0.1mlChloramphenicol  抗體 規(guī)格: 0.2ml