1.細(xì)胞系培養(yǎng)初期：保證培養(yǎng)基與微球體處于穩(wěn)定的PH與溫度水平，接種細(xì)胞(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，而非穩(wěn)定期)至終體積1/3的培養(yǎng)液中，以增加細(xì)胞與微載體接觸的機(jī)會(huì)。不同的微載體所用濃度及接種細(xì)胞密度是不同的。常使用2-3g/L的微載體含量，更高的微載體濃度需要控制環(huán)境或經(jīng)常換液。

2.貼壁階段(3-8d)后，緩慢加入培養(yǎng)液至工作體積，并且增加攪拌速度保證*均質(zhì)混合。

3.培養(yǎng)維持期：進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)(胞核計(jì)數(shù))、葡萄糖測(cè)定及細(xì)胞形態(tài)鏡檢。隨意細(xì)胞系增殖，微球變得越來(lái)越重，需增加攪拌速率。經(jīng)過(guò)3d左右，培養(yǎng)液開(kāi)始呈酸性，需換液：停止攪拌，讓微珠沉淀5min，棄掉適宜體積的培養(yǎng)液，緩慢加入新鮮培養(yǎng)液(37℃)，重新開(kāi)始攪拌。

4.收獲細(xì)胞：首先排干培養(yǎng)液，至少用緩沖液漂洗1遍，然后加入相應(yīng)的酶，快速攪拌(75-125r/min)20-30min。然后解離收集細(xì)胞及其產(chǎn)品。

5.微載體培養(yǎng)的放大：可以通過(guò)增加微載體的含量或培養(yǎng)體積進(jìn)行放大。使用異倍體或原代細(xì)胞系培養(yǎng)疫苗、干擾素，已被放大至4000L以上。