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動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒測(cè)定步驟如何進(jìn)行波長(zhǎng)比色

閱讀:126發(fā)布時(shí)間:2017-9-15

盡管動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒測(cè)定的操作步驟非常簡(jiǎn)單,但有可能會(huì)影響測(cè)定結(jié)果的因素卻較多,分布在測(cè)定操作的各步之中。本節(jié)內(nèi)容就波長(zhǎng)比色問(wèn)題展開(kāi)討論。  
    比色要注意波長(zhǎng)的選擇。以TMB為底物和以O(shè)PD為底物的試劑盒均有使用,而前者比色波長(zhǎng)為450nm,后者為492nm,濾光片需根據(jù)要求隨時(shí)更換。因此,容易出現(xiàn)濾光片錯(cuò)用的問(wèn)題。 
    其次,單波長(zhǎng)或雙波長(zhǎng)比色選擇的問(wèn)題。所謂的單波長(zhǎng)比色即是通常的以對(duì)顯色具有zui大吸收的波長(zhǎng)如450nm或492nm進(jìn)行比色測(cè)定;而雙波長(zhǎng)雙色則酶標(biāo)儀在敏感波長(zhǎng)如450nm和非敏感波長(zhǎng)如630nm下各測(cè)定一次,敏感波上下的吸光度測(cè)定值為樣本測(cè)定酶反應(yīng)特異顯色的吸光度與板孔上指紋、刮痕、灰塵等臟物所致的吸光度之和;非敏感波長(zhǎng)下測(cè)定即改變波長(zhǎng)至一定值,使得樣本測(cè)定酶反應(yīng)特異顯色的吸光度值為零,此時(shí)測(cè)得的吸光度即為臟物的吸光度值。zui后酶標(biāo)儀給出的數(shù)值為敏感波長(zhǎng)下的吸光度值與非常感波長(zhǎng)下的吸光度值的差。因此,雙波長(zhǎng)比色測(cè)定具有能排除由微滴板本身、板孔內(nèi)標(biāo)本的非特異吸收、指紋、刮痕、灰塵等對(duì)特異顯色測(cè)定吸光度的影響的優(yōu)點(diǎn)。由于ELISA測(cè)定中單個(gè)空白孔的非特異吸收上有一定程度的不確定性,也就是說(shuō)每次測(cè)定或同次測(cè)定空白孔位置的不同均有可能得到不同吸光度測(cè)定值,故而在動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒測(cè)定比色時(shí),是使用雙波長(zhǎng)比色。 
111850-201001    20mg    供含量測(cè)定    遠(yuǎn)志口山酮    常溫,避光
111852-201001    20mg    供含量測(cè)定用    寶藿苷Ⅰ    常溫,避光
111853-201001    20mg    供含量測(cè)定用    王不留行黃酮苷    常溫,避光
111854-201001    20mg    供含量測(cè)定用    槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖    常溫,避光
111855-201001    20mg    供含量測(cè)定用    偽原*(暫行)    常溫,避光
111858-201001    20mg    供含量測(cè)定用    絡(luò)石苷    常溫,避光
111859-201001    0.1ml    鑒別    α-松油醇(暫行)    2-8℃,避光
111861-201001    20mg    供含量測(cè)定用    竹節(jié)參皂苷ⅠVa(暫行)    常溫,避光
111863-201001    20mg    供含量測(cè)定用    三百草酮    常溫,避光
動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒

 


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