上海一研生物科研有限公司
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更新時間:2017-04-07 10:53:41瀏覽次數(shù):89次
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人轉(zhuǎn)基因細胞;K562-Wnt5a培養(yǎng)條件采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細胞復蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
細胞名稱 人轉(zhuǎn)基因細胞;K562-Wnt5a培養(yǎng)條件
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
人轉(zhuǎn)基因細胞;K562-Wnt5a培養(yǎng)條件冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
人轉(zhuǎn)基因細胞;K562-Wnt5a培養(yǎng)條件操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
購買人轉(zhuǎn)基因細胞;K562-Wnt5a培養(yǎng)條件注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
白色小莢孢囊菌 Microellobosporacandidus 葡萄球菌 Staphylococcussp.
Salmonellatyphimurium 鼠傷* 短短芽胞桿菌 Brevibacillusbrevis
暫無 Leuconostocgarlicum 多粘類芽胞桿菌 Paenibacilluspolymyxa
Pleurotuscystidiosus 蓋囊側(cè)耳 假單孢菌 Pseudomonassp.
分枝桿菌 Mycobacteriumsp. 假單胞菌 Pseudomonassp.
Rhizobiumloti 百脈根根瘤菌 節(jié)桿菌 Arthrobactersp.
Hypsizigussp. 玉蕈屬 酮叢毛菌 Comamonastestosteroni
楊氏檸檬酸桿菌 Citrobacteryoungae 動膠菌 Zoogloeasp.
Bacilluspumilus 短小芽胞桿菌 寡養(yǎng)單胞菌 Stenotrophomonassp.
Sporolactobacillusnakayamae 中山乳芽胞桿菌中山亞種 芽胞桿菌 Bacillussp.
粉擬青霉 Paecilomycesfarinosus 棒桿菌 Corynebacteriumsp.
雪白根霉 彎曲假單胞菌 Pseudomonasflectens
480-16-0 桑色素 2-(2,4-Dihydroxyphenyl)-3,5,7-trihydroxy-4H-chromen-4-one 302.2357 C15H10O7異黃芪皂苷II IsoastragalosideⅡ 86764-11-6 826.47 C43H70O15
83-49-8 * Hyodeoxycholic acid 392.58 C24H40O4黃花香茶菜Isodon sculponeata Sculponeatin A 黃花香茶菜甲素,黃花甲素,大萼變型甲素 85287-60-1 C20H24O6 ≥97%
10-* 10-Hydroxycamptothecin 67656-30-8 364.35 C20H16N2O5102036-29-3 原蘇木素B;原巴西蘇木素 (7S)-3,7,10,11-Tetrahydroxy-7,8-dihydro-6H-dibenzo[b,d]oxocin-7-methanol 304.29464 C16H16O6
97682-44-5 伊立替康 Irinotecan 586.69 C33H38N4O6馬桑Coriaria nepalensis Coriatin 馬桑亭 91653-75-7 C15H20O6 ≥98%
Peiminine 貝母素乙 18059-10-4 429.64 C27H43NO3蓽苃Piper longum 3-Chloro-4-hydroxypiperidin-2-one 3-氯-*-2-酮 174204-83-2 C5H8ClNO2 ≥95%
梔子Gardenia jasminoides Ellis Genipin-1-b-D-gentiobioside 京尼平-龍膽雙糖苷 29307-60-6 C23H34O15 ≥98%486-66-8 大豆苷元 Daidzein 254.24 C15H10O4
水龍骨科植物槲蕨 Drynaria fortunei (Kunze) J. Sm.的干燥根莖 Neoeriocitrin 新北美圣草苷 13241-32-2 C27H32O15 ≥98%白亮獨活Heracleum candicans Isogosferol 異栓翅芹醇 53319-52-1 C16H14O5 ≥96.5%
雞矢藤Paederia scandens Borreriagenin 巴戟醚萜 249916-07-2 C10H14O5 ≥95%苦參 Sophora flavescens Ait. Oxymatrine 氧化* 16837-52-8 C15H24N2O2 ≥98%
云南蘿芙木Rauvolfia yunnanensis β-Yohimbine Beta-育亨賓 549-84-8 C21H26N2O3 ≥95%刺桐Erythrina arborescens Phaseollidin hydrate (6AR-CIS)-6A,11A-二氫-10-(3-羥基-3-甲基丁基)-6H-苯并呋喃并[3,2-C][1]苯并吡喃-3,9-二醇 76122-57-1 C20H22O5 ≥95%
人轉(zhuǎn)基因細胞;K562-Wnt5a培養(yǎng)條件甜橙黃酮 Sinensetin 2306-27-6 372.3686 C20H20O7黃連堿 Bis[1,3]benzodioxolo[5,6-a:4',5'-g]quinolizinium,6,7-dihydro- 3486-66-6 320.31876 C19H14NO4+
異鼠李素-3-O-葡萄糖苷 Isorhamnetin-3-O-glucoside 5041-82-7 478.4 C22H22O12甲基辛弗林鹽酸鹽 4-(1-Hydroxy-2-(methylamino)propyl)phenol hydrochloride 7437-54-9 217.69254 C10H15NO2.HCl
Pinoresinol diglucoside 松脂醇二葡萄糖苷 63902-38-5 682.67 C32H42O16isorhynchophylline 異鉤藤堿 1811243 384.46872 C22H28N2O4
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