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1301:人急性T淋巴細胞使用說明書

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1301:人急性T淋巴細胞使用說明書:
     【細胞縮寫】    1301細胞
    【細胞名稱】    1301(人急性T淋巴細胞)
    【背景資料】    見細胞說明書
    【細胞消化時注意把握消化時間,消化不夠會導致吹打細胞時造成損傷,一般消化時間是2-3分鐘,但以鏡檢時大部分細胞縮回球形為準,一般2次即可將細胞吹打下來,消化不夠進行細胞吹打易損傷細胞。細胞系的凍存液配方:90%FBS+10%DMSO,貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)】    細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國內外大學建系
    【代次】    P4
    【規(guī)格】    復蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管(兩支)
    【細胞數(shù)】    1*10(6)
    【生物安全級別】    1
    【生物體】    人
    【組織來源】    器官:外周血;疾?。杭毙猿闪馨图毎园籽?;內皮
    【細胞形態(tài)】    T淋巴細胞
    【細胞特性】    懸浮
    【特別注意:1301:人急性T淋巴細胞如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng),貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng),如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時實驗室技術人員會跟進解決】    
細胞接收后的操作流程與注意事項:
1、如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時實驗室技術人員會跟進解決
2、貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(zui高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮*消化后,轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)
3、生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮1301:人急性T淋巴細胞進行培養(yǎng)
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)
1、吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,1301:人急性T淋巴細胞加2-3ml 0.25%*進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?-2min)
2、鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂?。┤サ?,加6-8ml*培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散
3、取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)?培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4、注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存
特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))
1、收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間zui長不宜超過72小時)
2、貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)
3、如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并實驗室。
Mouse Anti-influenza B virus nucleoprotein Monoclonal      規(guī)格:    規(guī)格:     0.1ml    產品名稱:    鼠抗人禽流感B核蛋白單克隆抗體
Anti-IFABP      規(guī)格:    規(guī)格:     0.2ml    產品名稱:    小腸型脂肪酸結合蛋白抗體
Anti-IFITM1       規(guī)格:    規(guī)格:     0.2ml    產品名稱:    干擾素誘導跨膜蛋白1抗體
Anti-IFN-β Anti-human      規(guī)格:    規(guī)格:     0.1ml    產品名稱:    干擾素-β抗體
Anti-IFN-γ     規(guī)格:    規(guī)格:     0.1ml    產品名稱:    鼠抗人干擾素-γ/IFN-gamma單克隆抗體
1301:人急性T淋巴細胞

 

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