原代細胞轉(zhuǎn)染方案  一般原則：建立一套適當?shù)霓D(zhuǎn)染方案;首先從一種標準方案開始，然后通過改變試劑/DNA的配比和復合物的劑量進行優(yōu)化。 轉(zhuǎn)染復合物的制備——諸如轉(zhuǎn)染試劑/DNA配比，離子強度，緩沖液pH值，以及溫度等變量都會影響到轉(zhuǎn)染復合物的組成和功能。質(zhì)?？捎脽o菌水或TE緩沖液稀釋。如果您要使用一種市售的轉(zhuǎn)染試劑，就應當仔細閱讀該試劑所提供的使用說明。在不含血清或其他蛋白的培養(yǎng)基中制備轉(zhuǎn)染復合物;如果制備復合物所使用的培養(yǎng)基含有血清，它就會對轉(zhuǎn)染產(chǎn)生抑制。制備轉(zhuǎn)染復合物的孵育時間是一個非常關鍵的環(huán)節(jié)，對于不同的轉(zhuǎn)染試劑而言可能差別很大。  轉(zhuǎn)染試劑/DNA配比(負載比)——所有的轉(zhuǎn)染試劑都會在某一個試劑/DNA配比時Z為有效。有時候這種配比的所在范圍非常狹窄;而且對于每種實驗體系都必須進行優(yōu)化才能得到配比。

形成轉(zhuǎn)染復合物所用的稀釋劑——對于多數(shù)試劑而言，很關鍵的一點是要使轉(zhuǎn)染復合物能在普通基礎培養(yǎng)基或鹽溶液中形成。 轉(zhuǎn)染復合物的加入——有兩種替換方法可用來將轉(zhuǎn)染復合物加入轉(zhuǎn)染細胞：1.將復合物濃縮液逐滴加入培養(yǎng)基，或者2.將轉(zhuǎn)染復合物先用培養(yǎng)基稀釋，然后進行培養(yǎng)基更換操作。*種方法更簡便，而第二種方法則更因為避免了試劑在局部濃聚而產(chǎn)生毒性，所以會使結果的一致性更好。 

時間進度  一般原則提示：要確保Z終結果的成功;建立一個合適的時間進度進行轉(zhuǎn)染實驗以保證您所需要的目的蛋白能得到表達。 原代細胞轉(zhuǎn)染的開始——在轉(zhuǎn)染前12小時，將細胞分種于培養(yǎng)板中。在細胞達到50-80%的融合率時開始轉(zhuǎn)染，這樣就可以使它們在實驗結束時達到接近的融合。細胞對轉(zhuǎn)染復合物的攝取通常在0.5-6小時的時間內(nèi)完成。在這段時間后，就不會再發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染效率有所增長。養(yǎng)基更換——某些轉(zhuǎn)染試劑在攝取階段之后需要更換培養(yǎng)基。
10605-21-7         苯硫咪唑相關物質(zhì)A標準品    30mg
        苯硫咪唑相關物質(zhì)B標準品    30mg
    Quazepam Related Compound A    夸西泮相關物質(zhì)A標準品    30mg
        美洛昔康相關物質(zhì)D標準品    30mg
        頭孢丙烯相關雜質(zhì)H標準品    30mg
        頭孢丙烯懸濁液標準品    30mg
        左沙丁胺醇鹽酸鹽相關物質(zhì)A標準品    30mg
        左沙丁胺醇鹽酸鹽相關物質(zhì)D標準品    30mg
99614-02-5     Ondansetron     昂丹司瓊標準品    300mg
959-24-0     Sotalol Hydrochloride     鹽酸索他洛爾標準品    300mg
92-13-7     Pilocarpine    毛果蕓香堿標準品    300mg
83915-83-7     Lisinopril     賴諾普利標準品    300mg
83-46-5     Beta-Sitosterol     β-谷固醇β-谷固醇標準品    300mg
原代細胞