細(xì)胞株凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來(lái)，這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。

除此之外，還可以利用細(xì)胞凍存的形式來(lái)購(gòu)買(mǎi)、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。細(xì)胞凍存時(shí)向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點(diǎn)降低，加之在緩慢凍結(jié)條件下，細(xì)胞內(nèi)水分透出，減少了冰晶形成，從而避免細(xì)胞損傷。 

采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細(xì)胞存活。標(biāo)準(zhǔn)冷凍速度開(kāi)始為-1 到 -2℃/min，當(dāng)溫度低于-25℃時(shí)可加速，到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃)。

細(xì)胞凍存的步驟

（1）選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min，10分鐘)。

（2）去上清液，加入含20%小牛血清的*培養(yǎng)基，于4℃預(yù)冷15分鐘后，逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為5×106～1×107/mL之間。（凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類(lèi)型來(lái)選擇，像有些科研君們就用corning胎牛血清,也有人用sigma的小牛血清）

（3）將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中，每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱(chēng)和凍存日期，同時(shí)作好登記（日期、細(xì)胞種類(lèi)及代次、凍存支數(shù)）。凍存管是長(zhǎng)什么樣子的？我們一起

（4）將裝好細(xì)胞株的凍存管放到凍存盒中，-80℃冰箱過(guò)夜。；如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜，放入液氮罐);或者可以在4℃，2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃，2h;-80℃，2h;放入液氮罐。（凍存盒和程序降溫盒長(zhǎng)啥樣。

（5）細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見(jiàn)，凍存半年后，取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    常溫，避光    規(guī)格:    含量測(cè)定    青陽(yáng)參苷元    20mg
進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    常溫，避光    規(guī)格:        西紅花苷-Ⅱ    20mg
進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    常溫，避光    規(guī)格:    含量測(cè)定    重樓皂苷Ⅱ    20nm
進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    常溫，避光    規(guī)格:    含量測(cè)定    重樓皂苷Ⅵ    10mg
進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    常溫，避光    規(guī)格:    含量測(cè)定    重樓皂苷Ⅶ    10mg
進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    常溫，避光    規(guī)格:    鑒別    總銀杏酸（套）    30mg
進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    常溫，避光    規(guī)格:    含量測(cè)定    胡黃連苷-Ⅱ    20mg
細(xì)胞株