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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第10年

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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR檢測(cè)試劑盒>>熒光PCR法>> 50T人RPⅡ基因熒光PCR法檢測(cè)試劑盒

人RPⅡ基因熒光PCR法檢測(cè)試劑盒

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)50T

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-07-20 20:21:34瀏覽次數(shù):190次

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人RPⅡ基因熒光PCR法檢測(cè)試劑盒客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)名稱(chēng)即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品特點(diǎn):

◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng):人RPⅡ基因熒光PCR法檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品分類(lèi):熒光PCR法
貨號(hào):CP99686
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年儲(chǔ)存條件:
14
℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1.
血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2.
血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3.
細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4.
組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5.
保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix 
(2mM)             
4 μl     
引物1(10pM)                 
2 μl     
引物2(10pM)                 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      
加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1.
標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3.
在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4.
換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7.
用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8.
如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.
如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。

107-35-7  Taurine  10mM(in1mLDMSO)  Yaba Monkey Tumor Virus(YMTV)亞巴猴腫瘤病毒病毒LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

107-35-7  Taurine  50mg  Yaba Monkey Tumor Virus(YMTV)亞巴猴腫瘤病毒病毒LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

1073612-91-5  CY-09  100mg  Myxosporidia spp.黏孢子蟲(chóng)屬通用LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

1073612-91-5  CY-09  10mg  Streptobacillus moniliformis念珠狀鏈桿菌LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度

1073612-91-5  CY-09  1mg  Teladorsagia circumcincta環(huán)紋背帶線蟲(chóng)LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50次  低溫  負(fù)20度
鹽酸坦洛新(標(biāo)準(zhǔn)品)Tamsulosin  質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定  APC蛋白共沉淀分析試劑盒5  載脂蛋白C3(Apo-C3)ELISA試劑盒 ,英文名: Apo-C3 ELISA Kit

托芬那酸(標(biāo)準(zhǔn)品)N-(3-Chloro-ortho-tolyl) anthranilic acid質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測(cè)定  Mousehemeoxygenase2,HO-2ELISA試劑盒小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  HumanαN-acetylglucosaminidase,αNAGELISA試劑盒人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

甲鈷胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Mecobalamin質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定  小鼠髓樣前體細(xì)胞抑制因子2(MPIF2)ELISA試劑盒 ,英文名: MPIF2 ELISA Kit  ELISAKitMMP-2小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A規(guī)格:48T/96T

單白前苷BVincetoxicoside B質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品  豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA檢測(cè)試劑盒guineapigmaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISAKit 96T/48T  HumanAlpha-Actin,αActinELISAKit人α肌動(dòng)蛋白(αActin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人RPⅡ基因熒光PCR法檢測(cè)試劑盒INS-1(大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 脆弱擬桿菌1-十六1(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))1-Hexadecene質(zhì)量規(guī)格:>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)1-十七1(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))1-Heptadecene質(zhì)量規(guī)格:>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

HAVCR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 TIM3 / HAVCR2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1-十九1(>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì))1-Nonadecene質(zhì)量規(guī)格:>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

人巨細(xì)胞白血病細(xì)胞株;Mo7e2-溴-4'-苯基乙酰苯(>98.0%(GC)(T))2-Bromo-4'-phenylacetophenone質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)

豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S1 牛腎細(xì)胞,MDBK細(xì)胞 PA12細(xì)胞,小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來(lái)自NIH3T3)丹磺酰氯(>98.0%(T))Dabsyl Chloride 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)


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