我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種，細胞庫管理規(guī)范，提供的細胞株背景清楚，提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

人體膀胱癌組織源細胞【Cancer: Human Bladder Cancer Derivatives】膀胱癌是發(fā)生于膀胱的癌病類疾病，泛指各種出自膀胱的惡性腫瘤，最常見的膀胱癌細胞來自膀胱內(nèi)面黏膜表皮，是一種移行上皮細胞，貼壁生長，具有無限增殖能力，喪失接觸抑制現(xiàn)象，癌細胞間粘著性減弱。公司科技提供來自新鮮或冷凍人體膀胱癌組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的人體組織標本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關(guān)節(jié)軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

潛在的應(yīng)用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué)；<6>芯片研究與表達圖譜。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。
細胞處理：
1） 復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細胞處理方法：
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度，細胞生長狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細技術(shù)指導(dǎo)，請及時電話或郵件聯(lián)系。
一．貼壁細胞
客戶接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
顯微鏡觀察細胞，當細胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
1000rpm,5min離心，重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO2  培養(yǎng)。
二．懸浮細胞
1. 接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO2  培養(yǎng)細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
1124175-25-2  (1R,3R)-3-Hydroxycyclopentane carboxylic acid methyl ester  50mg  Human Papillomavirus 16(HPV-16)瘤病毒16 LAMP試劑盒 

1124198-17-9  MAO-B-IN-1  10mg  Human Papillomavirus 13(HPV-13)瘤病毒13 LAMP試劑盒 

1124198-17-9  MAO-B-IN-1  1mg  Human Papillomavirus 14(HPV-14)瘤病毒14 LAMP試劑盒 

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APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株;7WPS1雙去氧基姜黃素(標準品)Bisdemethoxycurcumin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

TNFRSF9 Others Mouse 小鼠 4-1BB / TNFRSF9 / CD137 細胞裂解液 (陽性對照) L-山梨糖(標準品)L-(-)-Sorbose質(zhì)量規(guī)格：分析標準品

KP-N-NS 腎上腺神經(jīng)母細胞瘤(腦轉(zhuǎn)移)糖精鈉 水合物(標準品)Saccharin  salt hydrate質(zhì)量規(guī)格：分析標準品

SiHa頸鱗癌細胞 SiHa human uterine cervical squamous cell carcinoma MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS標準溶液(0.05000mol/L(0.1N))Iodine solution質(zhì)量規(guī)格：0.05000mol/L(0.1N)

SHH Protein Mouse 重組小鼠 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (His 標簽)標準溶液(1000μg/ml,溶劑：水)Iodine solution質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,溶劑：水
人體膀胱癌組織源細胞直銷家貓皮膚細胞;FCA-S1 胚肺成纖維細胞，HFL-I細胞 IEC-6細胞，大鼠小腸隱窩上皮細胞檸檬酸三丙酯(>97.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)Tripropyl

正常肺上皮細胞;BEAS-2BN-丁基苯磺酰胺(>98.0%(HPLC)(N))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(N)N-Butylbenzenesulfonamide

CD200R1L Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200RLa 細胞裂解液 (陽性對照) D-(+)-樟腦(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(+)-Camphor

原代成纖維細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml阿卡波糖十三醋酸酯質(zhì)量規(guī)格：美國進口Acarbose Tridecaacetate

CD38 Others Rabbit 兔 SCARB3 細胞裂解液 (陽性對照) 檸檬苦素，黃柏內(nèi)酯(橙皮提取) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,橙皮提取Limonin