我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種，細胞庫管理規(guī)范，提供的細胞株背景清楚，提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

小鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞【Mouse Lung: Normal Vein Endothelial Cells】產(chǎn)品描述：提供的原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務標準。
保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。
細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法：
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度，細胞生長狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細技術指導，請及時電話或郵件聯(lián)系。
一．貼壁細胞
客戶接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
顯微鏡觀察細胞，當細胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
1000rpm,5min離心，重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO2  培養(yǎng)。
二．懸浮細胞
1. 接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO2  培養(yǎng)G-B細胞活力和凋亡檢測試劑盒50 羥基茜草素 HPLC≥98% 20mg

G-B細胞活力和凋亡檢測試劑盒50 羥基吳茱萸堿 HPLC≥98% 20mg

GILLS蘇木素復染試劑盒50 羥基芫花素 HPLC≥98% 20mg

GMEM培養(yǎng)基1/10升(片劑) 喬松素 HPLC≥98% 20mg

GMS10電擊感受態(tài)細菌轉化試劑盒10 蕎麥堿 HPLC≥98% 20mg

GMS10化基因電轉感受態(tài)細菌5X100微升 茄尼醇 HPLC≥97% 20mg

GMS10化基因電轉感受態(tài)細菌5X100微升 芹菜苷 HPLC≥98% 10mg

GMS10化基因鈣轉感受態(tài)細菌10X100微升 芹菜素 HPLC≥98% 20mg

GMS10化基因鈣轉感受態(tài)細菌10X100微升 纈草醛 HPLC≥98% 5mg

GMS10化基因轉化感受態(tài)細菌1毫升 芹菜素（G鼠李糖）龍膽糖苷 HPLC≥98% 20mg
牛鋅金屬硫蛋白(Zn-MT)ELISA檢測試劑盒BovineZn-Metallothionein,Zn-MTELISAKit 96T/48T 泛昔洛韋  Famciclovir  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

人8-羥基鳥嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)試劑盒 Human OGG1 ELISA kit 泛昔洛韋（標準品）  Famciclovir  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%,標準品

英文名稱MouseIerleukin-16，IL-16ELISAKIT小鼠白介素-16(IL-16)規(guī)格：96T/48T 氟達拉濱酯  Fludarabine Phosphate   質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP,BR

冰凍切片組織PASE-3蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 噴昔洛韋  Penciclovir  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,細胞培養(yǎng)級

RatcoagulationfactorⅡ,FⅡELISA試劑盒大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 伊曲康唑  Itraconazole  質(zhì)量規(guī)格：>99%,EP6,BR,可用于細胞培養(yǎng)

小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒 ，英文名： gp130 ELISA Kit 伊曲康唑（標準品）  Itraconazole  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA檢測試劑盒MouseL-SelectinELISAkit 96T/48T 氟康唑  Fluconazole  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,CP2005,BR,可用于細胞培養(yǎng)

人骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒 Human BMP-2 ELISA kit 氟康唑（標準品）  Fluconazole  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

Ratfreefattyacids,FFAELISAKit大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 鹽酸齊拉西酮  Ziprasidone HCl  質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BR

AMCA蛋白標記試劑盒3(200微克/) 鹽酸齊拉西酮(標準品)  Ziprasidone HCl  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品
小鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞價格RPMI1640培養(yǎng)基1/10升(片劑) 羥基肉桂酸甲酯 HPLC≥98% 5mg

RPMI1640*培養(yǎng)液(無抗生素)500毫升 羥基去波生坦  Hydroxy Desmethyl Bosentan  質(zhì)量規(guī)格：美國進口

RPMI1640*培養(yǎng)液500毫升 羥基茜草素/紅紫素（標準品）  Purpurin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

RPMI1640細胞培養(yǎng)基A谷氨酰胺、高糖B同酸、HEPES、高糖C高糖、谷氨酰胺、HEPESD谷氨酰胺、同酸、HEPES500毫升 羥基茜草素 HPLC≥98% 20mg

RUNX3蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25 羥基千金子二萜醇 HPLC≥98% 20mg

RUNX3蛋白共沉淀分析試劑盒5 羥基匹格列酮標記d4  Hydroxy Pioglitazone Labeled d4  質(zhì)量規(guī)格：美國進口

RyR受體蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25 羥基匹格列酮（M-Ⅶ）β-D-葡萄糖苷酸  Hydroxy Pioglitazone (M-VII) β-D-Glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國進口

RyR受體蛋白表達檢測試劑盒20 羥基匹格列酮（M-Ⅶ）  Hydroxy Pioglitazone (M-VII)  質(zhì)量規(guī)格：美國進口

RyR受體蛋白共沉淀分析試劑盒5 羥基匹格列酮（M-Ⅳ）β-D-葡萄糖苷酸  Hydroxy Pioglitazone (M-IV) β-D-Glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國進口

S1核酶保護法檢測試劑盒5 羥基匹格列酮（M-Ⅳ）  Hydroxy Pioglitazone (M-IV)  質(zhì)量規(guī)格：美國進口
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。