小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞【Mouse Skin: Normal Epidermal Keratinocytes】 產(chǎn)品描述：提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶(hù)可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿(mǎn)50ml左右*培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用：客戶(hù)可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

收到凍存細(xì)胞的處理方法：
1.37°C水浴預(yù)熱培養(yǎng)基；
2.從液氮中取出細(xì)胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)暖細(xì)胞）；
3.在超凈臺(tái)中加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T25培養(yǎng)瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒(méi)有透氣孔的話(huà)，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養(yǎng)基給細(xì)胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕； 
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
英文名稱(chēng)Ratansferrieceptor大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)規(guī)格：96T/48T 8-乙氧基莫西沙星  8-Ethoxy Moxifloxacin  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

英文名稱(chēng)Ratansferrieceptor大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)規(guī)格：96T/48T 8-去甲氧基-8-氟莫西沙星  8-Desmethoxy-8-fluoro Moxifloxacin  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

英文名稱(chēng)RatAquaporin0大鼠水通道蛋白0(AQP0)規(guī)格：96T/48T 外消旋順式-莫西沙星?；?/span>-β-D-葡萄糖苷酸  rac cis-Moxifloxacin Acyl-β-D-glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

英文名稱(chēng)RatAquaporin0大鼠水通道蛋白0(AQP0)規(guī)格：96T/48T 莫西沙星鹽酸鹽一水合物  Moxifloxacin,  Monohydrate  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

英文名稱(chēng)RatAquaporin1大鼠水通道蛋白1(AQP1)規(guī)格：96T/48T 8-氟-6-甲氧基莫西沙星  8-Fluoro-6-methoxy Moxifloxacin  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

英文名稱(chēng)RatAquaporin1大鼠水通道蛋白1(AQP1)規(guī)格：96T/48T (R)-?；疗丈?/span>-β-D-葡萄糖苷酸芐基酯  (R)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide Benzyl Ester  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

英文名稱(chēng)RatAquaporin2大鼠水通道蛋白2(AQP2)規(guī)格：96T/48T (S)-?；疗丈?/span>-β-D-葡萄糖苷酸芐基酯  (S)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide Benzyl Ester  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

英文名稱(chēng)RatAquaporin2大鼠水通道蛋白2(AQP2)規(guī)格：96T/48T (R)-O-去萘普生  (R)-O-Desmethyl Naproxen  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

英文名稱(chēng)RatAquaporin3大鼠水通道蛋白3(AQP3)規(guī)格：96T/48T (S)-?；疗丈?/span>-β-D-葡萄糖苷酸  (S)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

英文名稱(chēng)RatAquaporin3大鼠水通道蛋白3(AQP3)規(guī)格：96T/48T (S)-萘普生異?；?/span>-β-D-葡萄糖苷酸  (S)-Naproxen Iso-acyl-β-D-glucuronide  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白4(G4)ELISA試劑盒 ，英文名： G4 ELISA Kit 撲熱息痛/對(duì)乙酰氨基酚  Paracetamol（Acetaminofen polvo）  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseurokinaseplasminogenactivator,uPAELISAkit 96T/48T 撲熱息痛(標(biāo)準(zhǔn)品)  Paracetamol（Acetaminofen polvo）  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

人肝素輔因子II-凝血酶(HCII-T)復(fù)合物試劑盒 Human heparin cofactor II-thrombin(HCII-T)complex ELISA kit 奧拉帕尼  Olaparib,AZD2281,KU0059436  質(zhì)量規(guī)格：≥98%,選擇性的PARP1/2抑制劑

RatHomocysteicacid,HcyELISAKit大鼠同型半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 奎尼丁  Quinidine  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%,BR

Bouin固著液50毫升 單甘油酯/甘油一酯  Monolaurin/1-Lauroyl-rac-glycerol  質(zhì)量規(guī)格：?jiǎn)熙ズ看笥?/span>40%

MouseIerleukin3,IL-3ELISA試劑盒小鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 甘油單油酸酯/單油酸甘油酯  Monoolein  質(zhì)量規(guī)格：度≥50%,油狀液體

小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3(G3)ELISA試劑盒 ，英文名： G3 ELISA Kit ADP.Na2; 5'-二腺苷二鈉/腺苷-5'-二二鈉鹽  Adenosine-5'-diphosphate di salt(ADPna)  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%,BR

小鼠可溶性壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sAIL)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousesolubletumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,sAILELISAKIT 96T/48T ADP; 5'-二腺苷/腺苷-5'-二  Adenosine 5'-(trihydrogen diphosphate)/ADP  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%,BR

人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)試劑盒 Human HCⅡ ELISA Kit 沙格列汀/沙克列汀  Saxagliptin monohydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,單水合物

RatHya]uronatebindingprotein,HABPELISAKit大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 更昔洛韋  Ganciclovir  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞說(shuō)明大鼠酪氨酸蛋白激酶JAK3(Jak3)試劑盒 Rat tyrosine-protein kinase JAK3,Jak3 ELISA kit 牡丹皮苷C HPLC≥98% 20mg

大鼠酪氨酸羥化酶(TH)試劑盒 Rat Tyrosine Hydroxylase,TH ELISA Kit 莫西沙星鹽酸鹽一水合物  Moxifloxacin,  Monohydrate  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

大鼠類(lèi)風(fēng)濕因子(RF)試劑盒 Rat Rheumatoid Factor,RF ELISA Kit 莫西菌素,莫西克汀(標(biāo)準(zhǔn)品)  Moxidectin   質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠類(lèi)5α還原酶1(SRD5A1)試劑盒 Rat Steroid 5-Alpha-Reductase 1,SRD5A1 ELISA Kit 莫西菌素,莫西克汀  Moxidectin   質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR

大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA檢測(cè)試劑盒RatGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit 96T/48T 莫特塞尼  Motesanib  質(zhì)量規(guī)格：>99%

大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)試劑盒 Rat Granulocyte Colony Stimulating Factor,G-CSF ELISA Kit 莫索尼定(標(biāo)準(zhǔn)品)  Moxonidine   質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA檢測(cè)試劑盒RatGranulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactor,GM-CSFELISAKit 96T/48T 莫索尼定  Moxonidine   質(zhì)量規(guī)格：度>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

大鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)試劑盒 Rat Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA Kit 莫沙必利N氧化物  Mosapride N-Oxide  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

大鼠亮氨酰氨基肽酶(LAP)試劑盒 Rat Leucine aminopepridase,LAP ELISA Kit 莫沙必利  Mosapride  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

大鼠細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratlymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISAKit 96T/48T 莫匹羅星,假單胞菌酸  Mupirocin  質(zhì)量規(guī)格：>920U/MG,USP
注意事項(xiàng)：
1.接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色
，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。