通常情況下，我們所使用的液相色譜柱在長時間使用后會出現(xiàn)柱效降低，分離度變差的情況。這時，我們需要對色譜柱進行再生。
再生
對于常用的反相色譜柱柱效降低需要再生時，建議按照以下流程沖洗：
1、20CV 水:乙腈=95%:5%
2、20CV 乙腈
3、5CV 異丙醇
4、20CV 正己烷
5、20CV 乙腈
6、20CV 水:乙腈=95%:5%
7、所使用的流動相重新平衡色譜柱。
學會了色譜柱的再生，我們也得了解如何在實驗過程中保護色譜柱。首先，我們需要了解色譜柱的損壞來源于哪些方面。
1、泵頭密封圈磨損。
2、進樣閥轉(zhuǎn)子密封圈磨損。
3、緩沖鹽的析出。
4、樣品中的復雜易吸附基質(zhì)組分。
這些問題大多會造成色譜柱背壓升高。
預防
為了降低色譜柱損傷問題，建議在使用色譜柱時做一些預防措施。
1、在液相系統(tǒng)中加入在線過濾器
在線過濾器的內(nèi)部顆?？障兑话銥?.5μm，對于UHPLC會選擇0.2μm空隙的在線過濾器。這個空隙尺寸接近或略小于柱頭的篩板尺寸。所以，在線過濾器可以有效地阻隔來自樣品、泵頭密封墊。進樣閥轉(zhuǎn)子密封墊的顆粒物，乙方柱頭過濾篩板堵塞。
2、在柱子前端使用保護柱
保護柱有很多種，通用型、一體式、卡套式均為與分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。因其具有與分析柱相同的內(nèi)部填料，所以保護住不僅可以阻隔顆粒物，還可以阻隔易吸附的樣品基質(zhì)組分。
3、對樣品進行凈化處理
常用的凈化手段是過濾，包括0.45μm、0.22μm微孔濾膜等。
保存
實驗結(jié)束后，色譜柱的合理保存也是保護色譜柱的關(guān)鍵，同時也是影響色譜柱使用壽命的關(guān)鍵。
1、短期保存
應保存在***接近常用的流動相條件下，并且移除系統(tǒng)中的緩沖鹽、酸等。
2、長期保存
將色譜柱按照說明書保存在對應的溶劑中，并且將色譜柱從系統(tǒng)中去下，兩頭 用堵頭密封。
