HPLC靈敏度不夠主要原因及解決辦法
1、樣品量不足，解決辦法為增加樣品量
2、樣品未從柱子中流出?？筛鶕?jù)樣品的化學(xué)性質(zhì)改變流動(dòng)相或柱子
3、樣品與檢測(cè)器不匹配。根據(jù)樣品化學(xué)性質(zhì)調(diào)整波長(zhǎng)或改換檢測(cè)器
4、檢測(cè)器衰減太多。調(diào)整衰減即可。
5、檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)太大。解決辦法為降低時(shí)間參數(shù)
6、檢測(cè)器池窗污染。解決辦法為清洗池窗。
7、檢測(cè)池中有氣泡。解決辦法為排氣。
8、流動(dòng)相流量不合適。調(diào)整流速即可。
為什么HPLC柱柱壓過高
柱壓過高是HPLC柱用戶***常碰到的問題。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的問題，您可按下面步驟檢查問題的起因。
1、拆去保護(hù)預(yù)柱，看柱壓是否還高，否則是保護(hù)柱的問題，若柱壓仍高，再檢查（在安裝了保護(hù)預(yù)柱的情況下）；
2、把色譜柱從儀器上取下，看壓力是否下降，若壓力仍高則是管路堵塞，需清洗，若壓力下降，再檢查；
3、將柱子的進(jìn)出口反過來接在儀器上，用10倍柱體積的流動(dòng)相沖洗柱子，（此時(shí)不要連接檢測(cè)器，以防固體顆粒進(jìn)入流動(dòng)池）。這時(shí)，如果柱壓仍不下降，再檢查；
4、更換柱子入口篩板，若柱壓下降，說明您的溶劑或樣品含有顆粒雜質(zhì)，正是這些雜質(zhì)將篩板堵塞引起壓力上升。若柱壓還高，請(qǐng)與廠商聯(lián)系。
液相色譜中峰出現(xiàn)拖尾或雙峰的原因
1、篩板堵塞或柱失效，解決辦法是反向沖洗柱子，替換篩板或更換柱子。
2、存在干擾峰，解決辦法為使用較長(zhǎng)的柱子，改換流動(dòng)相或更換選擇性好的柱子
如何解決保留時(shí)間發(fā)生漂移或急速變化漂移現(xiàn)象
1、溫度控制不好，解決方法是采用恒溫裝置，保持柱溫恒定
2、流動(dòng)相發(fā)生變化，解決辦法是防止流動(dòng)相發(fā)生蒸發(fā)、反應(yīng)等
3、柱子未平衡好，需對(duì)柱子進(jìn)行更長(zhǎng)時(shí)間的平衡
快速變化現(xiàn)象
1、流速發(fā)生變化，解決辦法是重新設(shè)定流速，使之保持穩(wěn)定
2、泵中有氣泡，可通過排氣等操作將氣泡趕出。
3、流動(dòng)相不合適，解決辦法為改換流動(dòng)相或使流動(dòng)相在控制室內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)混合。
HPLC儀器問題
1、我的HPLC泵壓明顯的偏高，請(qǐng)問可能的原因？
答：流速設(shè)定過高；流動(dòng)相或進(jìn)樣中有機(jī)械雜質(zhì)，造成保護(hù)柱、柱前篩板或在線過濾器阻塞；流動(dòng)相粘度過大；柱溫過低；緩沖鹽結(jié)晶；壓力傳感器故障。
2、基線不穩(wěn)，上下波動(dòng)或漂移的原因是什么，如何解決？
答：a.流動(dòng)相有溶解氣體；用超聲波脫氣15-30分鐘或用充氦氣脫氣
b.單向閥堵塞；取下單向閥，用超聲波在純水中超20分鐘左右，去處堵塞物
c.泵密封損壞，造成壓力波動(dòng)；更換泵密封
d.系統(tǒng)存在漏液點(diǎn)；確定漏液位置并維修
f.柱后產(chǎn)生氣泡；流通池出液口加負(fù)壓調(diào)整器
g.檢測(cè)器沒有設(shè)定在******吸收波長(zhǎng)處；將波長(zhǎng)調(diào)整至******吸收波長(zhǎng)處
h.柱平衡慢，特別是流動(dòng)相發(fā)生變化時(shí)；用中等強(qiáng)度的溶劑進(jìn)行沖洗，更改流動(dòng)相時(shí)，在分析前用10-20倍體積的新流動(dòng)相對(duì)柱子進(jìn)行沖洗。
3、接頭處為何經(jīng)常漏液，如何處理？
答：接頭沒有擰緊；擰松后再緊，手緊接頭以手勁為限，不要使用工具，不銹鋼接頭先用手?jǐn)Q緊，再用專用扳手緊1/4-1/2圈，注意接頭中的管路一定要通到底，否則會(huì)留下死體積。接頭被污染或磨損；建議更換接頭。接頭不匹配，建議使用同一品牌的配件。
4、進(jìn)樣閥漏液是如何造成的？
答：a.轉(zhuǎn)子密封損壞；更換轉(zhuǎn)子密封
b.定量環(huán)阻塞；清洗或更換定量環(huán)
c.進(jìn)樣口密封松動(dòng)；調(diào)整松緊度
d.進(jìn)樣針頭尺寸不合適，一般是過短；使用恰當(dāng)?shù)倪M(jìn)樣針（注意針頭形狀）
e.廢液管中產(chǎn)生虹吸；清空廢液管
譜圖問題
1、問：造成峰拖尾的原因是什么，如何消除？
答：a.篩板阻塞；反沖色譜柱、更換進(jìn)口篩板
b.色譜柱塌陷；填充色譜柱
c.有干擾物質(zhì)的存在；使用更長(zhǎng)的色譜柱、改變流動(dòng)相或更換色譜柱
e.流動(dòng)相PH值不合適；調(diào)整PH值，對(duì)于堿性化合物，低PH值更有利于得到對(duì)稱峰
f.樣品與填料表面的溶化點(diǎn)發(fā)生反應(yīng)；加入離子對(duì)試劑或堿性揮發(fā)性修飾劑或更改色譜柱
2、問：造成峰分叉的原因是什么，如何消除？
答：保護(hù)柱或分析柱污染；取下保護(hù)柱再進(jìn)行分析。如果必要更換保護(hù)柱。如果分析柱阻塞，拆下來清洗。如果問題仍然存在，可能是柱子被強(qiáng)保留物質(zhì)污染，運(yùn)用適當(dāng)?shù)脑偕胧?。如果問題仍然存在，入口可能被阻塞，更換篩板或更換色譜柱。樣品溶劑不溶于流動(dòng)相；改變樣品溶劑，如果可能采取流動(dòng)相作為樣品溶劑。
3、問：K值增加時(shí)，拖尾更嚴(yán)重，這是為什么？
答：反相模式，二級(jí)保留效應(yīng)；a.加入三乙胺（或堿性樣品）b.加入乙酸（或酸性樣品） c.加入鹽或緩沖劑（或離子化樣品）
d.更換一支柱子
4、問：保留時(shí)間的波動(dòng)有幾種可能的原因？
答：溫控不當(dāng)；調(diào)節(jié)好柱溫。流動(dòng)相組分變化；防止流動(dòng)相蒸發(fā)、反應(yīng)等，做梯度時(shí)尤其要注意流動(dòng)相混合的均勻。色譜柱沒有平衡；在每一次運(yùn)行之前給予足夠的時(shí)間平衡色譜柱。
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