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閱讀：876發(fā)布時間：2022-8-18
小編***近在工作過程當(dāng)中，遇到幾份不同的分析方法，都在柱切換的過程當(dāng)中對細(xì)節(jié)沒有把控到位。所以，今天我們***來談?wù)勚袚Q的那些事情。
關(guān)于相互等效的色譜柱，小編發(fā)現(xiàn)很多小伙伴已經(jīng)都記下了，這點(diǎn)在前述的很多篇文章中均有提及。
對比某個分析方法，發(fā)現(xiàn)與藥典方法除了色譜柱規(guī)格不一致以外，包括溫度、梯度、甚至是色譜柱品牌型號在內(nèi)的所有其他條件均一致。色譜柱規(guī)格差異在于：1、150*4.6,3um；2、250*4.6,5um。
哪里有問題呢？相同的柱效，同樣的線速度。
相同的內(nèi)徑提示同樣的流速即可******相同的線速。若上述柱切換的方法為等度方法，則僅僅只需增加洗脫時間即可。但是，對于梯度方法，由于切換前后柱體積發(fā)生了變化，若要******梯度變化相同，則需要******洗脫的柱體積倍數(shù)相同。如果更嚴(yán)格一些，還應(yīng)當(dāng)包括不同儀器間系統(tǒng)死體積的差異。
不同規(guī)格色譜柱間的梯度洗脫程序存在如下等式：
從上述等式可以看出，當(dāng)流速一致，色譜柱內(nèi)徑一致，梯度維持時間與柱長成正比。也***是說，色譜柱越長，梯度持續(xù)的時間越久。
轉(zhuǎn)換非常簡單，如果在這個基礎(chǔ)上還想偷懶。也行！各家的軟件中，上都附帶各種梯度轉(zhuǎn)換的計算，大家可以去嘗試一下。只需輸入系統(tǒng)死體積及柱1，柱2的規(guī)格，全程自動，無需使用計算器。
當(dāng)然，上述的轉(zhuǎn)換只針對一致的填料間的轉(zhuǎn)換。在前述的很多篇文章中也一直強(qiáng)調(diào)，不同填料色譜柱之間選擇性是有差異的，是無法進(jìn)行這種不同規(guī)格上的等效轉(zhuǎn)換的。
另外，在轉(zhuǎn)換過程當(dāng)中，需要關(guān)注系統(tǒng)體積差異帶進(jìn)來的擴(kuò)散效應(yīng)，特別是從長柱切換到高效柱的方法中。柱外體積對小柱子的影響更為明顯。這也是為何小編一直強(qiáng)調(diào)除了理解理論知識以外，多去看看硬件，很多問題并不單純是方法帶來的。
不同品種的方法，有著不同的策略。理解方法開發(fā)之初的目的和策略，定能讓我們的工作事半功倍。
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