成都摩爾科學(xué)儀器有限公司
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閱讀：401發(fā)布時間：2022-8-19
液相色譜柱使用久了，會出現(xiàn)分離度降低，理論塔板數(shù)降低等柱效降低的現(xiàn)象，適當(dāng)處理能使柱效恢復(fù)。但不是所有色譜柱都能倒沖的，要到?jīng)_的話，******是咨詢一下你買色譜柱的廠家。如果你不知道怎么倒沖?？梢栽囋囅旅娴姆椒樞?/p>
常規(guī)處理:硅膠、氧化鋁、極性鍵合相色譜柱每一次用完后用低流速長時間的二氯甲烷或正己烷等溶劑沖洗;鍵合相硅膠色譜柱、離子交換色譜柱和凝膠色譜柱先用蒸餾水沖洗,再用甲醇沖洗,然后用甲醇與蒸餾水以一定比例混合的溶液沖洗后過夜。
對于已使用一段時間后柱效下降的色譜柱可按以下方法進行再生。再生處理包括活化（右→左）和凈化（左→右）兩種。
硅膠、氧化鋁、極性鍵合相色譜柱按下列順序沖洗:******基戊烷或己烷←→三氯乙烷←→乙酸乙脂←→丙酮←→乙醇←→水。鍵合相硅膠柱:蒸餾水←→甲醇（沖洗 過程中可加入少量二甲基甲酰胺）。離子交換樹脂柱:高濃度的NaCl溶液（1-2molL的NaCl溶液）可使大部分樹脂再生,油脂等少數(shù)與樹脂緊密結(jié)合 的物質(zhì)可用低濃度堿溶液（如0.1molL的NaOH溶液）沖洗,酸性有機物吸附在固定相的用低pH緩沖液沖洗,堿性有機物用高pH緩沖液沖洗,然后再用 蒸餾水←→甲醇←→二氯甲烷←→甲醇←→蒸餾水沖洗。
凝膠色譜柱:由于凝膠色譜柱是根據(jù)被分離物質(zhì)的分子量大小而分離物質(zhì),通常用稀的*或非離子型 去垢劑（0.2%-1%NP-40或Lubrol）沖洗可除去大部分的結(jié)合物質(zhì),如果一些污染物仍然不能清除時,用24%或30%乙腈沖洗過夜可除去疏水 蛋白,用30%-50%乙酸可除去親水蛋白,用蛋白水解酶處理可分解凝膠中剩余的痕量,然后再用蒸餾水←→甲醇←→蒸餾水沖洗。本方法試用于大多數(shù)的凝膠色譜柱。如安捷倫，沃特斯，賽分凝膠色譜柱等等
已污染的液相色譜柱的處理:因保留強的物質(zhì)污染,流動相或樣品中不溶物沉積于柱頭,可用下列方法洗滌:去除脂類可用*、乙腈或甲醇洗滌;去除蛋白質(zhì)可用 乙腈、丙醇和1%三進行梯度洗脫;一些高疏水性化合物可用乙腈或甲醇洗脫,同時反復(fù)注入100-200ml的*。
柱頭處理:對于柱頭堵塞污染嚴(yán)重的情況而且用溶劑沖洗無效的色譜柱,只有打開柱子去除柱頂?shù)奶盍现匮b:先拆下不銹鋼燒結(jié)過濾器,檢查柱床,常見凹陷或受污 染的帶色填料,剔去不規(guī)則床層和帶色填料,使柱床顯白色并******水平,再用甲醇作糊狀填料勻漿液,將糊狀填料勻漿液滴在柱上靠重力從勻漿液中排出甲醇液,重 復(fù)直到填料水平。
液相色譜柱的保存:首先柱子必須清洗干凈后才能保存,柱子不能貯存在水或水性溶劑中,否則會引起微生物的滋生。極性色譜柱可用適當(dāng)溶劑如二氯甲烷沖洗;鍵合相色 譜柱用甲醇沖洗;陰離子交換色譜柱用0.002%洗必泰的緩沖液沖洗,陽離子交換色譜柱用0.005%硫柳汞緩沖液沖洗;凝膠色譜柱用緩沖液中加 0.02%或用20%乙醇沖洗。再將柱子兩頭密封,以防止溶劑蒸發(fā)使柱子干燥而引起柱子結(jié)構(gòu)的幾何學(xué)改變。
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