在高效
液相色譜法發(fā)展的多年中，圍繞如何提高
色譜柱效率這個中心問題，填充色譜柱的固定相已發(fā)生了急劇的變化，由無定形填料到球形填料，由薄殼型填料到全多孔填料，由大顆粒到小顆粒，由全多孔粒子到灌流色譜的流通粒子，由全多孔球形微粒到非多孔的更小微粒。上述柱填料的變化使色譜工作者利用降低柱填料粒徑的方法，已使色譜柱的柱效相對穩(wěn)定在10000~25000/m（理論塔板數(shù)）之間。
由于使用小粒徑的填料會導(dǎo)致色譜柱高壓力降，使用現(xiàn)代高效設(shè)備，其的操作壓力已限定在35~40MPa，因此當欲用1~3μm的柱填料時，只能使用3~5cm的短色譜柱，這樣通過調(diào)節(jié)柱長，而使所希望的柱效和柱壓力降之間的矛盾得到妥善的解決，但此時只能使用較低的流速來實現(xiàn)快速分析。在高效液相色譜分析中，如欲在較短分析時間內(nèi)獲得高柱效，可以采用以下幾種方法：
使用填充微小粒子（1~1.5μm）的KB毛細管柱（50cm），再直接施以超高壓（100~400MPa），此即為超高壓毛細管液相色譜。
使用開管柱液相色譜，由于柱制備和柱容量的局限，至今未獲得發(fā)展。
使用如毛細管電泳中的電滲流。它不存在壓力降，但需使用專門的電滲泵。
在高柱溫下操作，由于涉及流動相的揮發(fā)性在實踐中存在一定困難。
通過增強色譜柱的滲透性、以降低柱壓力降、并促進溶質(zhì)的傳質(zhì)擴散。這可通過使用具有高滲透性的整體色譜柱來實現(xiàn)。推薦使用成都摩爾科學(xué)儀器有限公司提供的賽分色譜柱、
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