一、反相色譜柱
以C18為代表的高效反相液相色譜柱一直被描述為藥物發(fā)現(xiàn)、開(kāi)發(fā)、方法驗(yàn)證的心臟。 高效反相液相色譜柱也******廣泛應(yīng)用在藥物代謝及動(dòng)力學(xué)、生命科學(xué)、醫(yī)療健康、生物分析檢測(cè)、和檢測(cè)、食品安全分析、環(huán)境分析、軍事、國(guó)土安全等領(lǐng)域。 高效反相液相色譜制備柱也是***重要的分離純化技術(shù)之一。
無(wú)論是過(guò)去,現(xiàn)在和可預(yù)見(jiàn)的未來(lái), 以球形B型硅膠(5um 或 3um)為材料骨架的高效反相液相色譜柱在實(shí)際應(yīng)用中永遠(yuǎn)占有統(tǒng)治地位。常規(guī)HPLC方法的開(kāi)發(fā)幾乎總是從C18作為出發(fā)點(diǎn),反相色譜占了80%以上的應(yīng)用。
二、高效正相液相色譜柱
正相液相色譜是***早的色譜模式。直到現(xiàn)在, 合成后通過(guò)硅膠柱做進(jìn)一步純化仍然是有機(jī)化學(xué)家日常工作的一個(gè)重要組成部分。在理論上, 幾乎所有的溶于正己烷,乙酸乙酯或異丙醇的有機(jī)化合物都可以用高效正相液相色譜分析。但在實(shí)際應(yīng)用中,高效正相液相色譜的應(yīng)用比高效反相色譜少得多。這是因?yàn)檎和? 乙酸乙酯沒(méi)有像水,甲醇或乙腈那樣受歡迎。此外, A型硅膠正相液相色譜給客戶一個(gè)慣性思維: 高效正相液相色譜的平衡時(shí)間很長(zhǎng)。
事實(shí)上, 高效正相液相色譜在制備規(guī)模的色譜純化中一直發(fā)揮了重要作用。這是因?yàn)?
(1) 高效正相液相色譜比高效反相色譜柱壓低得多。
(2) 高效正相液相色譜用的溶劑例如正己烷, 乙酸乙酯很容易通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去。 (3) 吡咯等蒸發(fā)性溶劑******改善了堿性有機(jī)化合物在B型球形硅膠, Diol和PEG正相液相色譜柱上的峰形。
此外, 不管制備規(guī)?；蚍治鰷y(cè)試,
(1) 結(jié)構(gòu)異構(gòu)體分離分析必須使用正相液相色譜或超臨界流體色譜。
(2) 環(huán)境中腐殖酸的結(jié)構(gòu)鑒定必須使用甲基化或硅烷化消除小分子聚集, 然后使用正相液相色譜或超臨界流體色譜。這種小分子聚集的自然現(xiàn)象一定相當(dāng)廣泛。 PEG正相液相色譜鍵合相等將讓客戶重新評(píng)估高效正相液相色譜的價(jià)值。
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