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液相色譜柱的清洗溶劑

閱讀:818發(fā)布時間:2022-8-21

成都摩爾科學儀器有限公司告訴你液相色譜柱的清洗溶劑。色譜柱是指裝填有固定相用以分離混合組分的柱管。色譜柱的正確使用和維護十分重要,稍有不慎***會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中,需要注意下列問題,以維護色譜柱。



液相色譜柱的清洗溶劑

硅膠柱以正已烷(或庚烷)、二氯甲烷和甲醇依次沖洗,然后再以相反順序依次沖洗,所有溶劑都必須嚴格脫水。甲醇能洗去殘留的強極性雜質(zhì),已烷使硅膠表面重新活化。反相柱以水、甲醇、乙腈、一氯甲烷(或氯仿)依次沖洗,再以相反順序依次沖洗。如果下一步分析用的流動相不含緩沖液,那么可以省略***后用水沖洗這一步。一氯甲烷能洗去殘留的非極性雜質(zhì),在甲醇(乙腈)沖洗時重復(fù)注射100~200μl*數(shù)次有助于除去強疏水性雜質(zhì)。*與乙腈或甲醇的混合溶液能除去類脂。有時也注射二甲亞砜數(shù)次。此外,用乙腈、丙酮和三氟醋酸(0.1%)梯度洗脫能除去蛋白質(zhì)污染。

陽離子交換柱可用稀酸緩沖液沖洗,陰離子交換柱可用稀堿緩沖液沖洗,除去交換性能強的鹽,然后用水、甲醇、二氯甲烷(除去吸附在固定相表面的有機物)、甲醇、水依次沖洗。(推薦賽分HP-SCX陽離子交換色譜柱)

⑦保存色譜柱時應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發(fā)干燥。******禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時間。

液相色譜柱使用過程中,如果壓力升高,一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞,這時應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M行清洗;另一種可能是大分子進入柱內(nèi),使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形,則可能柱頭出現(xiàn)塌陷,死體積增大。

在后兩種情況發(fā)生時,小心擰開柱接頭,用潔凈小鋼將柱頭填料取出1~2mm高度(注意把被污染填料取凈)再把柱內(nèi)填料整平。然后用適當溶劑濕潤的固定相(與柱內(nèi)相同)填滿色譜柱,壓平,再擰緊柱接頭。這樣處理后柱效能得到改善,但是很難恢復(fù)到新柱的水平。

柱子失效通常是柱端部分,在分析柱前裝一根與分析柱相同固定相的短柱(5~30mm),可以起到保護、延長柱壽命的作用。采用保護柱會損失一定的柱效,這是值得的。

通常色譜柱壽命在正確使用時可達2年以上。以硅膠為基質(zhì)的填料,只能在pH2~9范圍內(nèi)使用。柱子使用一段時間后,可能有一些吸附作用強的物質(zhì)保留于柱頂,特別是一些有色物質(zhì)更易看清被吸著在柱頂?shù)奶盍仙?。新的色譜柱在使用一段時間后柱頂填料可能塌陷,使柱效下降,這時也可補加填料使柱效恢復(fù)。PS:(推薦使用賽分色譜柱)

每次工作完后,******用洗脫能力強的洗脫液沖洗,例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡。當采用鹽緩沖溶液作流動相時,使用完后應(yīng)用無鹽流動相沖洗。含鹵族元素(氟、氯、溴)的化合物可能會腐蝕不銹鋼管道,不宜長期與之接觸。裝在液相色譜儀上柱子如不經(jīng)常使用,應(yīng)每隔4~5天開機沖洗15分鐘。 
 
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成都摩爾科學儀器有限公司提供的產(chǎn)品系列包括:各類食品檢測和藥品檢測涉及的從分析到制備等規(guī)格齊全、填料齊全的液相色譜柱、氣相色譜柱、 純化填料、品種規(guī)格齊全樣品前處理固相萃取柱和免疫親和柱;檢測的色譜柱以及純化用的系統(tǒng)成套設(shè)備和各種填料;同時,成都摩爾科學儀器有限公司也是各品牌色譜柱、儀器的配件耗材(如氘燈、石墨管、單向閥等)、常規(guī)實驗室消耗品(如針頭過濾器(含滅菌器)、過濾膜(含除菌膜)、樣品瓶(含頂空瓶)及相關(guān)蓋墊、 移液器、標準品(食品和環(huán)境等)和各種分析檢測儀器(如液相色譜儀、氣相色譜儀、培養(yǎng)箱、生物安全柜、天平、pH計等綜合集成供應(yīng)商。

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