造成液相色譜柱柱壓升高的可能原因有很多。一般是由于色譜柱篩板或柱頭發(fā)生了堵塞,造成流動(dòng)相阻力加大所引起。當(dāng)然色譜系統(tǒng)其他部分發(fā)生堵塞,也可能表現(xiàn)為柱壓(系統(tǒng)壓力)升高。所以在發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)壓力升高時(shí),可首先使用兩通短接色譜柱觀察相同條件下系統(tǒng)本壓是否正常,排除壓力升高為系統(tǒng)其他部分造成。
1液相色譜柱篩板堵塞,這往往是由于流動(dòng)相沒(méi)有過(guò)濾,或雖已過(guò)濾但濾膜孔徑過(guò)大或?yàn)V片損壞,使固體雜質(zhì)滯留在篩板上造成的。推薦使用(MS過(guò)濾膜)可采用反沖的方法去除堵塞物。對(duì)于 5 或 3.5um填料的賽分色譜柱,建議采用 0.45um 膜厚過(guò)濾樣品,1.8um 填料的賽分色譜柱,請(qǐng)采用 0.2um膜厚過(guò)濾樣品。推薦使用賽分色譜柱,又成都摩爾科學(xué)儀器有限公司專業(yè)提供,
2 同樣類似堵塞也會(huì)發(fā)生于排氣閥過(guò)濾芯、在線過(guò)濾器和保護(hù)柱,這時(shí)建議更換成都摩爾科學(xué)儀器有限公司提供的濾芯,在線過(guò)濾器內(nèi)的篩板或保護(hù)柱內(nèi)的柱芯。
3 非特異性吸附 當(dāng)部分組分在色譜柱柱子上有較強(qiáng)的非特異性吸附,且當(dāng)前所用的流動(dòng)相難以將它們洗脫時(shí),強(qiáng)保留組分的累積則會(huì)造成阻力增大和壓力升高。可使用適當(dāng)?shù)娜軇_洗以除去吸附物質(zhì)。
4 樣品的沉淀 當(dāng)樣品所用的溶劑與流動(dòng)相不一致時(shí),樣品進(jìn)入液相色譜柱中時(shí)有可能因溶解度降
低而沉淀出來(lái),造成壓力升高。此時(shí)建議使用對(duì)樣品有較高溶解度的溶劑沖洗。
5 鹽晶體的析出 使用較高濃度的緩沖液或添加有緩沖液的流動(dòng)相后,如果沖洗不******,緩沖液中的無(wú)機(jī)鹽成分可能會(huì)殘留在體系之中。它們會(huì)因在新流動(dòng)相體系中溶解度降低而析出,造成流動(dòng)相阻力加大,壓力升高。
6 更換流動(dòng)相時(shí)置換不****** 當(dāng)改換流動(dòng)相體系時(shí),不******的更換使不同性質(zhì)、互不相溶的流動(dòng)相存在一個(gè)體系中,也會(huì)造成壓力升高。可使用混溶的溶劑(異丙醇)******沖洗。
備注:
賽分液相色譜柱沖洗建議
反相色譜柱 用以下溶劑至少各 25mL 沖洗色譜柱(分析柱)
? 不含緩沖鹽的流動(dòng)相
? ****甲醇
? ****乙腈
? 75%乙腈+25%異丙醇
? ****異丙醇
? ****二氯甲烷 *
? ****己烷*
*若使用己烷或二氯甲烷沖洗色譜柱, 則在重新使用反相流動(dòng)相以前, 必須用異丙醇沖洗色譜柱 !!!
正相色譜柱 用以下溶劑至少各 50mL 沖洗色譜柱(分析柱)
? 50%甲醇+50%
? ****乙酸乙酯
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成都摩爾科學(xué)儀器有限公司提供的產(chǎn)品系列包括:各類食品檢測(cè)和藥品檢測(cè)涉及的從分析到制備等規(guī)格齊全、填料齊全的液相色譜柱、氣相色譜柱、 純化填料、品種規(guī)格齊全樣品前處理固相萃取柱和免疫親和柱;檢測(cè)的色譜柱以及純化用的系統(tǒng)成套設(shè)備和各種填料;同時(shí),成都摩爾科學(xué)儀器有限公司也是各品牌色譜柱、儀器的配件耗材(如氘燈、石墨管、單向閥等)、常規(guī)實(shí)驗(yàn)室消耗品(如針頭過(guò)濾器(含滅菌器)、過(guò)濾膜(含除菌膜)、樣品瓶(含頂空瓶)及相關(guān)蓋墊、 移液器、標(biāo)準(zhǔn)品(食品和環(huán)境等)和各種分析檢測(cè)儀器(如液相色譜儀、氣相色譜儀、培養(yǎng)箱、生物安全柜、天平、pH計(jì)等綜合集成供應(yīng)商。