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液相色譜常見(jiàn)六個(gè)問(wèn)題

閱讀：406發(fā)布時(shí)間：2022-8-25

故障1：
流動(dòng)相內(nèi)有氣泡，關(guān)閉泵，打開(kāi)排空閥，按PURGE鍵清洗脫氣，氣泡不斷的從過(guò)濾器冒出，進(jìn)入流動(dòng)相，無(wú)論打開(kāi)PURGE鍵幾次，都無(wú)法清除不斷產(chǎn)生的氣泡。
原因：
過(guò)濾器長(zhǎng)期沉浸于水液內(nèi)，過(guò)濾頭內(nèi)部由于霉菌的生長(zhǎng)繁殖，形成菌團(tuán)阻塞了過(guò)濾器，緩沖液難以流暢的通過(guò)過(guò)濾頭，空氣在泵的壓力下經(jīng)過(guò)過(guò)濾器進(jìn)入流動(dòng)相.處理過(guò)濾頭浸泡在5%的硝酸溶液內(nèi)，超聲清洗十五分鐘即可；亦可將過(guò)濾頭浸泡在5%的硝酸溶液中12～36小時(shí)，輕輕震蕩幾次，再將過(guò)濾器用純水清洗幾次，打開(kāi)排空閥，打開(kāi)PURGE鍵清洗脫氣如仍有氣泡不斷從過(guò)濾器冒出，繼續(xù)將過(guò)濾器浸泡在5%硝酸溶液中，如沒(méi)有氣泡不斷從過(guò)濾器冒出,說(shuō)明過(guò)濾器內(nèi)部的霉菌菌團(tuán)以被硝酸破壞,流動(dòng)相可以流暢的通過(guò)過(guò)濾器，打開(kāi)排空閥，打開(kāi)泵流速調(diào)治1.0～3.0mL/min，純水沖洗過(guò)濾器1小時(shí)左右，即，可將過(guò)濾器清洗干凈。關(guān)閉泄壓閥，純甲醇沖洗半小時(shí)即可。

故障2：
柱壓高；
原因：
(1)緩沖液鹽份如，乙酸銨等，沉積柱內(nèi)；
(2)樣品污染沉積：
處理對(duì)于******種情況先用40～50度的純水，低速正向沖洗柱子待柱壓逐漸下降后，相應(yīng)的提高流速?zèng)_洗柱壓大幅度下降后，用常溫純水沖洗，之后用純甲醇沖洗柱子30分鐘，對(duì)于第2種情況，由樣品的沉積引起污染的C18柱，和純水反向沖洗柱子，然后換成甲醇沖洗，接著用甲醇+異丙醇[4+6]沖洗柱子[沖洗時(shí)間的長(zhǎng)短由樣品的污染情況而定]，在用換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，***后甲醇沖洗，正向沖洗柱子30分鐘以上。

故障3：既無(wú)壓力指示又無(wú)液體流過(guò)
原因：
1.泵密封墊圈磨損；
2.大量氣體進(jìn)入泵體：
處理對(duì)于******種情況,更換密封墊圈，對(duì)于******種情況,在泵作用的同時(shí)，用一個(gè)50mL的玻璃針筒在泵的出口處不幫助抽出空氣。

故障4：壓力波動(dòng)大，流量不穩(wěn)定。
原因：
系統(tǒng)中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間家有異物，使得兩者不能密封；
處理：工作中注意流動(dòng)相的量，******不銹鋼濾器沉入儲(chǔ)液器瓶底，避免吸入空氣，流動(dòng)相要充分脫氣，如，為單向閥和閥座之間夾有異物，拆下單向閥，放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗。

故障5：
出峰不準(zhǔn)，峰分叉。
原因：
(1)色譜柱被污染；
(2)柱頭填料塌陷：
處理對(duì)于******種情況,先用純水反向沖洗柱子，然后換成甲醇沖洗,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時(shí)間的長(zhǎng)短由樣品污染的情況而定)，再換成甲醇沖洗，然后，再用純水沖洗，***后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上，如，沖洗后依然出峰不佳，則考慮******種情況。對(duì)于******種情況，擰開(kāi)柱頭，檢查柱填料是否硬結(jié)或塌陷，去除硬結(jié)部分(污染的填料)，裝入新填料，滴一滴甲醇，填料下陷，再填，用與助內(nèi)徑相同的頂端平滑的不銹鋼桿壓緊，再填平，滴甲醇，再壓緊反復(fù)幾次，直至裝滿填平。柱頭用甲醇沖洗干凈，擦凈柱外壁的填料，擰緊柱頭，用純甲醇沖洗30分鐘以上。

故障6：
峰面積重復(fù)性不佳。
原因：
（1）進(jìn)樣閥漏夜；
（2）加樣針不到位：
處理：
對(duì)于******種情況更換進(jìn)樣墊圈；對(duì)于******種情況******加樣針插到底，注射樣品溶液后須快速，平穩(wěn)地從LOAD狀態(tài)轉(zhuǎn)換到INJECT狀態(tài)，以******進(jìn)樣量的******。日常生活中，液相色譜儀的保養(yǎng)非常重要，如要注意不要讓空氣進(jìn)入輸液系統(tǒng)和高壓泵中，儲(chǔ)液器內(nèi)的溶液如時(shí)間未用應(yīng)清洗儲(chǔ)液器并更換溶液，每次用完色譜儀后緩沖溶液要用純水沖洗干凈，防止無(wú)機(jī)鹽析出或沉積；樣品的前處理也很重要，任何樣品都要盡可能地去除雜質(zhì)，******溶解，盡量減少對(duì)色譜柱的污染，以延長(zhǎng)色譜住的使用壽命，同時(shí)，避免注射過(guò)量濃的樣品溶液，以免殘留液在進(jìn)樣閥內(nèi)析出固體引起堵塞；色譜住作好標(biāo)記，用于不同分析目的的色譜住不要混用等。

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