苯甲酸和山梨酸是常用的食品防腐劑，國(guó)家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)《食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》GB2760-2007對(duì)其在食醋、醬油和面醬中的******使用做了明確的規(guī)定，合理地使用防腐劑能延長(zhǎng)食品的使用期限。
在食品檢驗(yàn)工作中，由于在現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.29-2003《食品中山梨酸、苯甲酸的測(cè)定》和GB/T23495-2009《食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測(cè)定 高效液相色譜法》中沒(méi)有明確描述食醋、醬油和面醬中苯甲酸和山梨酸的液相色譜法的樣品處理方法，對(duì)檢驗(yàn)工作有一定的影響。作者在日常的檢測(cè)工作中，摸索出了一種簡(jiǎn)便可行的樣品前處理方法。
1.1設(shè)備材料：成都摩爾科學(xué)儀器有限公司提供的LC-2000液相色譜儀、柱溫箱、臺(tái)式高速離心機(jī)、電子分析天平、50mL比色管、0.45微米水相用針筒式過(guò)濾器、10mL醫(yī)用注射器、1.5mL塑料離心管、pH廣泛試紙。
1.2.3乙酸氨溶液：稱(chēng)取1.54g乙酸銨，溶解后用水定容于1000mL容量瓶中，混勻。
1.2.4溶液：稱(chēng)取106.0g，加適量水加熱溶解，冷卻后用水定容于1000mL容量瓶中，混勻。
1.2.5乙酸鋅溶液：稱(chēng)取乙酸鋅220.0g，加適量水加熱溶解，冷卻后加入30mL冰乙酸，用水定容于1000mL容量瓶中，混勻。
1.2.6*溶液（0.5mol/L）:稱(chēng)取*20.0g，加水溶解，冷卻至室溫后定容于1000mL容量瓶中，混勻。
1.2.7硫酸溶液（0.5 mol/L）: 吸取濃硫酸15mL緩慢加入約250mL水中，同時(shí)不斷攪拌，冷卻至室溫后，定容于500mL容量瓶中，混勻。
1.2.8溶液：稱(chēng)取2g（優(yōu)級(jí)純），加水至100mL，混勻。
1.2.9苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：******稱(chēng)取0.1000g苯甲酸，加溶液5mL，加熱溶解，移入100mL容量瓶中，加水定容至100mL，苯甲酸含量為1.0mg/mL，作為儲(chǔ)備溶液。
1.2.10山梨酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：******稱(chēng)取0.1000g山梨酸，加溶液5mL，加熱溶解，移入100mL容量瓶中，加水定容至100mL，山梨酸含量為1.0mg/mL，作為儲(chǔ)備溶液。
1.2.11苯甲酸和山梨酸混合標(biāo)準(zhǔn)使用溶液：吸取苯甲酸、山梨酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液各10.0mL，放入100mL容量瓶中，加水至刻度。此溶液含苯甲酸和山梨酸各0.100mg/mL。經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾后待用。
稱(chēng)取食醋、醬油和面醬5.0g(******至0.1mg)于50mL比色管中，加水20mL，吸取*溶液調(diào)節(jié)樣液pH值為8，若pH值大于8時(shí)，可用硫酸溶液反調(diào)。再加入溶液2mL，加蓋搖勻，***后加入乙酸鋅溶液2mL, 加蓋振搖，靜止約10分鐘至泡沫消失，用水定容至50mL，混勻。轉(zhuǎn)移適量處理液于50mL離心管中，經(jīng)10000轉(zhuǎn)/分、5min離心沉淀處理，再用注射器吸取離心管上清液經(jīng)針筒式過(guò)濾器過(guò)濾于1.5mL塑料離心管中，上機(jī)待測(cè)。
4.1 一般情況下，在這三類(lèi)食品中，苯甲酸和山梨酸主要是其水溶性鹽（鈉鹽、鉀鹽）存在，又由于食醋、醬油和面醬都屬發(fā)酵法生產(chǎn)，成分比較多，它們都含有少量的游離蛋白質(zhì)，都呈酸性，通過(guò)調(diào)節(jié)樣品pH值至近中性、沉淀蛋白、離心分離、微膜過(guò)濾操作后***可上機(jī)檢測(cè)。
4.2 在判斷樣液的pH時(shí)采用廣泛試紙即能滿足實(shí)驗(yàn)要求，操作簡(jiǎn)單、方便、直觀，用酸度計(jì)判別樣液的pH操作繁瑣；在調(diào)節(jié)樣液pH時(shí)使用了*溶液和硫酸溶液，其對(duì)實(shí)驗(yàn)沒(méi)有影響。
4.3 在實(shí)際檢測(cè)中，可將標(biāo)準(zhǔn)中推薦的甲醇和乙酸銨的比例由5+95提高到10+90，有利于較好較快完成實(shí)驗(yàn)，該條件下目標(biāo)峰附近沒(méi)有雜質(zhì)峰影響、分離度好（大于1.5，約為2.9），且苯甲酸和山梨酸可在16分鐘內(nèi)完成（苯甲酸保留時(shí)間約為8.7min、山梨酸保留時(shí)間約為11.5min）。
4.4 該方法的工作曲線mg/mL范圍內(nèi)，防腐劑的濃度C和峰面積A呈良好的線 方法的回收率和精密度。以不含苯甲酸和山梨酸的食醋為對(duì)象，進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)。
苯甲酸加標(biāo)回收率在99.4%～104.0%，山梨酸加標(biāo)回收率在95.6%～96.1%，該方法******度高，可滿足實(shí)驗(yàn)室實(shí)際檢測(cè)需要。
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