成都摩爾科學儀器有限公司
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閱讀：299發(fā)布時間：2022-8-26
液相色譜法作為21世紀一種快速發(fā)展的應用分析方法。在很多領域都能夠見到它的身影。21世紀人們對科學技術的發(fā)展越來重視，使得我們分析的對象也越來越復雜，分析要求也越來約高。液相色譜的****在于能夠滿足我們現(xiàn)在所分析的對象。
高效液相色譜儀是在經典液相色譜的基礎上，引入氣相色譜的理論和技術而發(fā)展起來的。在高效液相色譜中，流動相與組分之間有一定的親和力，分離過程的實現(xiàn)是組分、流動相和固定相三者間相互作用的結果，分離不但取決于組分和固定相的性質，還與流動相的性質密切相關，一般情況下，高效液相色譜儀的分析可在室溫下進行，由于采用顆粒極細的固定相，柱內壓降很大，加******動相黏度高，因此必須采用高入口壓，以此來維持一定的流動相線速。高效液相色譜儀對于揮發(fā)性低、熱穩(wěn)定性差、分子量大的物質特別有利，它在醫(yī)藥、生化等方面具有非常重要的作用。
色譜柱的常見問題：
1.色譜柱污染：
目前,基層實驗室多采用反相色譜柱,要減少色譜柱的污染***有效的辦法是要純化樣品。凡是樣品純化得越干凈,色譜柱的壽命***越長;反之,只有提取沒有純化的樣品,色譜柱柱效***會大幅下降。一般來說,要提取純化好的樣品,******的方法是用流動相溶解樣品,這樣,一方面能減少色譜圖中的溶劑峰干擾,另一方面也能檢查樣品在流動相中的溶解性。如果樣品進樣后在流動相中沉淀,會堵塞進樣器和柱頭,甚至樣品分解,出現(xiàn)鬼峰。如果出現(xiàn)樣品與流動相不溶要設法改變溶解條件,可更換樣品溶劑,或改進樣品純化處理的方法,或濾過去除不溶性物質。
2.色譜柱阻塞與對策
如果配有保護柱,應先去掉保護柱進行分析。如果色譜柱阻塞,可進行反沖洗。如果問題仍然存在,色譜柱可能被強保留的污染物損壞,建議使用恰當?shù)脑偕绦?。如果問題仍然存在,可能是進口阻塞,更換入口處的篩板或更換色譜柱。如果必要,亦可更換色譜柱。
3.嚴格清場
清洗的過程是延長色譜柱壽命的關鍵,每次分析工作結束時,要做好清場工作。如果流動相是緩沖鹽,先用5%甲醇水沖洗30 min以上；如果流動相是離子對,先用50%甲醇水沖洗30 min以上；如果流動相是酸性溶劑,先用純水沖洗30 min以上,流速0.5 mL#min-1,***后過度到用色譜甲醇沖洗色譜柱,目的是沖去吸附在柱上的強保留組分。如果用甲醇-水為流動相也應這樣沖洗色譜柱,在一定程度上可恢復柱效。
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