新C18柱的活化及應(yīng)用
飯相色譜柱也叫
C18色譜柱。在化學(xué)分析行業(yè)中得到廣泛的應(yīng)用。
色譜柱的活化，說白了***是一個(gè)平衡的過程。不光是流動(dòng)相要平衡，。有些時(shí)候我們還得對(duì)要測試的樣品對(duì)新柱子進(jìn)行平衡。還有，測試分子量很高的多肽更為重要，因?yàn)榉肿恿扛叩奈镔|(zhì)擴(kuò)散速度很慢，平衡的話時(shí)間也相對(duì)比較長，平衡的方式比較簡單，樣品多進(jìn)幾次，等到峰的面積和時(shí)間穩(wěn)定在進(jìn)行正式進(jìn)樣測試。
假如是要加速平衡的時(shí)間，那***直接把前面要測試的樣品濃度加大或者不等洗脫完畢，連續(xù)多進(jìn)樣多針，使用要測試的物質(zhì)對(duì)新柱進(jìn)行平衡，***能加快平衡時(shí)間了。
分子量多肽不高的話 我們一般選擇C18色譜柱***能很好的測定。也有用
離子交換柱，親水作用色譜柱，
水性C18色譜柱等。、
2、氨基柱柱效的恢復(fù)
氨基柱在進(jìn)酸性樣品時(shí)，很傷柱子，如使用一段時(shí)間后，柱效降低，峰形改變，如何恢復(fù)？
氨基柱測酸性樣品，應(yīng)該是用氨基柱的HILIC模式。酸的存在可能會(huì)使略帶負(fù)電荷的氨基官能團(tuán)質(zhì)子化，導(dǎo)致使用一段時(shí)間后對(duì)于某些類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降。
建議：用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0％NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗該柱(沖洗后當(dāng)然要再用不含堿的流動(dòng)相洗去多余氨)，之后再進(jìn)行分析這類酸性分析物時(shí)建議在流動(dòng)相中略微添加少許氨如0.1％。
3、色譜柱技術(shù)
色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù)，填料技術(shù)自不待言，填料的好壞對(duì)色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)也沒有想象中的這么簡單，不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長度，裝柱工藝都有所不同，要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床，更多是一門藝術(shù)，需要經(jīng)驗(yàn)積累。
液相色譜柱裝填實(shí)際上是有一定技巧和程序，可能還有一些運(yùn)氣。一般使用高壓勻漿方法裝填。也***是能讓填料在溶劑內(nèi)均勻地懸浮。然后用瞬間高壓壓實(shí)，這實(shí)際上用到了不同比例的勻漿液體，和合適的壓力。壓力太大，顆粒破碎，壓力太小，塔板數(shù)少。同時(shí)壓力需要穩(wěn)定，不然分布不均，拖尾嚴(yán)重。同時(shí)還有頭上平整程度。套上套，***可以用了。
國內(nèi)和國外相比，色譜柱的差距在于：國內(nèi)公司以前都不會(huì)自己開發(fā)填料，一般買國外現(xiàn)成填料裝柱，買到的填料質(zhì)量控制權(quán)不在自己手里。另外因?yàn)檠b柱歷史短，經(jīng)驗(yàn)積累少，裝柱工藝也沒有******達(dá)到國外水平。另外，對(duì)色譜柱性能很關(guān)鍵的基礎(chǔ)材料-----裸硅膠，國產(chǎn)的還不過關(guān)，在純度、粒徑和孔徑的均一性方面和國外產(chǎn)品相比，差距很大。
4、色譜柱的清洗和保護(hù)
色譜柱如果被污染了。***把污染的地方取出然后裝上一些填料。因?yàn)槿绻惆焉V柱臟的地方掛掉了。那么微觀的理論塔板數(shù)***少了。如果你刮的不多的話，僅僅是看起來的表明層次。也許***是刮的臟污，所以你把問題解決了。但是今后還是會(huì)遇見相同的問題。再刮或者不小心刮的話可能會(huì)影響柱子的分析效果，。成都摩爾科學(xué)儀器有限公司提醒******還是裝一個(gè)預(yù)裝柱
一般工作完畢之后把色譜柱取下來的時(shí)候我們需要做什么？
答：對(duì)于一般的反相色譜柱，我們把他洗干凈之后放到純甲醇里面。然后用東西把柱子的兩頭都賽緊，避免里面的物質(zhì)揮發(fā)。不需要做太多的其他保護(hù)
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