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液相色譜的等度和梯度的不同

閱讀:130發(fā)布時(shí)間:2025-3-24


 液相色譜的等度洗脫說(shuō)的是我們?cè)趯?shí)驗(yàn)過(guò)程的時(shí)候從開(kāi)始到結(jié)束只用一種流動(dòng)相,也***是只用一個(gè)泵來(lái)輸送相同的流動(dòng)相。
   液相色譜的梯度洗脫是說(shuō)在同一個(gè)時(shí)間段隨著分析周期按照一定的程序梯度性地來(lái)改變洗脫液的比列或者pH等成分。選擇把層析柱里面不同的組分洗脫出來(lái)的方法,從而可以讓一個(gè)復(fù)雜的樣品中的極性物質(zhì)差異比較大的組分能夠按照各自能適應(yīng)的狀態(tài)來(lái)達(dá)到目的。梯度洗脫可以用3個(gè)梯度來(lái)表示。有二元高壓梯度,二元低壓梯度,和四元低壓梯度。二元高壓梯度需要用到兩臺(tái)高壓泵,但是二元低壓梯度和四元低壓梯度都(只需要一個(gè)高壓泵和一個(gè)比列閥)。那么液相色譜里面等度和梯度又有什么差別呢?


 
  液相色譜配置特點(diǎn):
 
  1. 等度洗脫只需要配置一臺(tái)高壓泵,配置相對(duì)簡(jiǎn)單,成本低;
 
  2. 二元高壓梯度洗脫需要配置兩臺(tái)高壓泵,一個(gè)混合器及連接管理,配置較高,成本高;
 
  3. 二元低壓梯度洗脫需要配置一臺(tái)高壓泵、一個(gè)二元比例閥、一臺(tái)在線脫氣機(jī)、一個(gè)混合器(脫氣機(jī)和混合器視情況而定,可不選)及連接管路,配置較低,成本較低;
 
  4. 四元低壓梯度洗脫需要配置一臺(tái)高壓泵、一個(gè)四元比例閥、一臺(tái)在線脫氣機(jī)、一個(gè)混合器(視情況而定,可不選)及連接管路,配置較高,成本較低。
 
    液相色譜等度和梯度的優(yōu)缺點(diǎn):
 
  1.等度洗脫優(yōu)點(diǎn):流速不發(fā)生變化,壓力穩(wěn)定,實(shí)驗(yàn)結(jié)果******、******;
 
  缺點(diǎn):多組分檢測(cè)或有雜質(zhì)干擾情況下分離度可能會(huì)差,而且不容易優(yōu)化,對(duì)于某些復(fù)雜樣品分析時(shí)間長(zhǎng),峰形差。
 
  2.二元高壓梯度洗脫優(yōu)點(diǎn):每臺(tái)泵的流速都由程序控制,a.多組分檢測(cè)或有雜質(zhì)干擾情況下提高分離能力,b.縮短某些復(fù)雜樣品的分析時(shí)間,c.改善峰形,減少拖尾,d.提高柱效,增加檢測(cè)靈敏度;
 
    缺點(diǎn):
 
  a.流速變化得由程序控制,有時(shí)會(huì)出錯(cuò)。
 
  b.壓力可能會(huì)不穩(wěn)定。
 
  c.混合時(shí)可能會(huì)產(chǎn)生氣泡,影響基線噪聲及漂移。
 
  d.高壓混合時(shí)可能會(huì)產(chǎn)生熱量。
 
  e.對(duì)混合器要 求很高,如果混合不好,基線噪聲和漂移會(huì)很大。
 
  f.由于流動(dòng)相比例發(fā)生變化,基線可能會(huì)漂移。
 
  g.實(shí)驗(yàn)******度、穩(wěn)定性沒(méi)有等度高。
 
  h.故障率高于等度。
 
  3.二元低壓梯度優(yōu)點(diǎn):只需一臺(tái)泵一個(gè)比例閥,***能達(dá)到梯度洗脫效果;
 
  缺點(diǎn):低壓混合可能會(huì)產(chǎn)生氣泡,梯度穩(wěn)定性和******度不高。
 
  4.四元低壓梯度優(yōu)點(diǎn):只需一臺(tái)泵和一個(gè)比列閥,***能達(dá)到梯度洗脫效果,并且同時(shí)可以控制四種流動(dòng)相。
 
  缺點(diǎn):低壓混合可能會(huì)產(chǎn)生氣泡,需要加在線脫氣機(jī),梯度穩(wěn)定性和******度不高,對(duì)比列閥要求很高,梯度滯后體積大。
 

  檢測(cè)要求:不同物質(zhì)(所測(cè)物質(zhì))分離度一定要好,峰形要好,分析時(shí)間要短,穩(wěn)定性、******度盡量高,實(shí)驗(yàn)成本盡量低等等。

液相色譜

 
   液相色譜的配置建議:
 
  1.采樣高效液相色譜法實(shí)驗(yàn)時(shí),對(duì)儀器的配置一般盡量簡(jiǎn)單。儀器配置復(fù)雜后,操作***會(huì)復(fù)雜,穩(wěn)定性、******度可能會(huì)受影響,故障率***會(huì)高,使用成本也會(huì)高。在能達(dá)到較好的分離度及峰形的情況下能用等度***用等度;
 
  2.同時(shí)檢測(cè)多種復(fù)雜成分,或是有干擾物的情況下,為達(dá)到滿意的峰形、分離度、分析時(shí)間,***得使用梯度洗脫方式了。各種成分可以使用不同比例的流動(dòng)相進(jìn)行洗脫,如農(nóng)殘檢測(cè)、氨基酸檢測(cè)等。要求高的話采用高壓梯度洗脫,要求低的話采用低壓梯度洗脫;
 
  3.流動(dòng)相種類相對(duì)簡(jiǎn)單的話采用二元低壓梯度洗脫,相對(duì)復(fù)雜的話(如洗脫時(shí)需要四種不同溶液的流動(dòng)相)采用四元低壓梯度洗脫。

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