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閱讀：62發(fā)布時(shí)間：2025-3-25
大家都知道液相色譜，但是液相色譜有哪些種類。你們都認(rèn)識(shí).都使用過(guò)嗎？下面成都摩爾科學(xué)儀器有限公司為大家介紹一下液相色譜都有哪些常見(jiàn)的種類。
首先來(lái)做個(gè)小實(shí)驗(yàn)：
把一塊黃油和一勺蔗糖分別放入水中，我們會(huì)發(fā)現(xiàn)，黃油很難溶解，而蔗糖很快溶解。這***是常說(shuō)的“相似相溶"。
極性分子蔗糖與極性的水分子作用力強(qiáng)，因此，蔗糖很容易溶解在水中。
而黃油是由許多非極性分子組成的，更易溶于非極性溶劑中。
了解了相似相溶原理，接下來(lái)我們來(lái)看液相色譜的分類。
液相色譜有很多種類，其中正相色譜是***先被發(fā)明出來(lái)的，它的特點(diǎn)是色譜柱里固定相極性大于流動(dòng)相的極性。
在正相色譜中，流動(dòng)相是弱極性的，比如正己烷，石油醚等。
而固定相是有極性的，比如布滿硅羥基的硅膠。
這些極性的硅羥基***像賽道兩邊的小手，和進(jìn)入色譜柱的化合物發(fā)生相互作用。
根據(jù)相似相溶原理，極性大的化合物和小手的作用更強(qiáng)，出峰***會(huì)慢一些。
極性弱的化合物與硅羥基彼此不感興趣，出峰***會(huì)快一些。
在化學(xué)家掌握了硅膠的化學(xué)鍵合技術(shù)之后，反相色譜得到了很大的發(fā)展。
正如其名，反相色譜***是和正相色譜反過(guò)來(lái)。
它的流動(dòng)相是強(qiáng)極性的，比如甲醇/水
而固定相是弱極性的，比如十八烷基鍵合硅膠柱，也叫C18柱，***是把硅膠上原本的硅羥基變成了一條碳十八的長(zhǎng)鏈。
這樣一來(lái)硅膠表面***從強(qiáng)極性變成了弱極性。
雖然正相色譜是先發(fā)明的，但使用并不普遍。現(xiàn)在，反相色譜的應(yīng)用占到了所有液相應(yīng)用的80%以上。
一來(lái)，反相色譜的流動(dòng)相不再需要烴類、氯仿這些更危險(xiǎn)的有機(jī)溶劑，使用起來(lái)更加簡(jiǎn)單和安全。
二來(lái)，液相和氣相是互相補(bǔ)充的技術(shù)。極性弱，沸點(diǎn)低的化合物優(yōu)先用氣相分析。
而極性強(qiáng)的化合物由于分子間作用力更強(qiáng)，往往沸點(diǎn)不低，不適合用氣相分析，更適合用反相液相色譜分析。
這是為什么呢？
另外，反相色譜的流動(dòng)相有更多的參數(shù)選擇，比如pH、緩沖鹽的種類和濃度等，能更好地調(diào)整分離效果，而正相色譜可調(diào)整的流動(dòng)相參數(shù)非常有限。此外，還有一些化合物，既不適合用正相分析，也不適合用反相分析，比如糖類。
因?yàn)樘穷愑泻芏嗔u基，極性很強(qiáng)。
若用反相分析，糖和C18沒(méi)有相互作用，出峰太快，無(wú)法分離。
若用正相分析，糖類又不能溶解在正己烷這種非極性的流動(dòng)相里，也無(wú)法分離。
這種情況，我們可以嘗試使用親水作用色譜，HILIC模式。
近幾年關(guān)于LCMS的HILIC應(yīng)用研究非常熱門，它使用類似于正相的色譜柱，比如硅膠，和傳統(tǒng)反相的流動(dòng)相，比如乙腈/水。
這樣的組合即能夠溶解樣品，又能夠保留樣品，***終使樣品得到很好的分離。
如果化合物的極性特別強(qiáng)，一言不合***電離。
還可以選擇離子對(duì)色譜，或者離子交換色譜，來(lái)增強(qiáng)離子和固定相的相互作用，使不同的化合物得到分離。
不管是正相、反相還是離子交換色譜，化合物出峰的情況都是和極性相關(guān)的，而凝膠色譜的出峰卻只和化合物的大小有關(guān)，所以也叫體積排阻色譜。
當(dāng)樣品流經(jīng)凝膠色譜柱時(shí)，直徑較大的化合物，不易進(jìn)入凝膠顆粒的微孔中，所以很快出峰。
而直徑較小的化合物會(huì)進(jìn)入凝膠顆粒的微孔中，并不斷的進(jìn)出和擴(kuò)散，因此，較晚出峰。
本文來(lái)自（色譜學(xué)堂）
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