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技術(shù)文章

液相色譜分析中如何才能提高分離度？

閱讀：44發(fā)布時(shí)間：2025-3-25

液相色譜分析中如何才能提高分離度？ 
柱效(Efficiency)
.折射出色譜柱柱子的性能，柱子效果越好，分離的條件***越好，在其它恒定的條件情況下，如果塔板數(shù)增加了一倍，但是分離度大約只會(huì)提高百分之40%。我們?cè)诓僮鬟^(guò)程中，可以通過(guò)下面的方法來(lái)提高色譜分析的效果。首先，需要使用長(zhǎng)的色譜柱柱管或者拿2個(gè)色譜柱來(lái)反應(yīng)色譜柱的性能。柱子的效率越高。說(shuō)明分離條件***越好，還有一個(gè)***是使用粒徑填料的色譜柱，但是這個(gè)需要耐更高壓力的液相色譜系統(tǒng)。所以兩者之間一對(duì)比，后面的情況更為可觀。
選擇性(selectivity)


是指色譜柱-流動(dòng)相體系分離兩個(gè)化合物的能力。選擇性主要與固定相、流動(dòng)相組成以及柱溫等因素有關(guān)，與保留值也密切相關(guān)，其中固定相和流動(dòng)相組成影響較大。以***常見(jiàn)的反相模式為例，反相柱(包括C18、C8、PH等)是以分配作用對(duì)化合物進(jìn)行保留的，不同化合物的分離是基于它們?cè)阪I合相與流動(dòng)相中分配系數(shù)的差異，如果兩種化合物的水溶性、在烷烴-水體系的分配系數(shù)等方面存在明顯差異，那么這些化合物通常是能夠利用反相柱達(dá)到分離；PH柱對(duì)具有苯環(huán)的化合物具有特殊保留。正相模式下，硅膠柱、胺基柱、氰基柱與帶有極性基團(tuán)的化合物之間存在極性相互作用，對(duì)化合物的基團(tuán)具有選擇性，常常用于結(jié)構(gòu)類(lèi)似物、異構(gòu)體化合物的分離。流動(dòng)相方面，降低流動(dòng)相的洗脫強(qiáng)度通?？梢栽龃蠓蛛x度；而有機(jī)溶劑類(lèi)型也會(huì)影響分離，比如反相條件下，乙腈和甲醇的選擇性***存在很大差異，這種差異需要在實(shí)踐中摸索，但無(wú)論如何，多種溶劑類(lèi)型帶給我們更多的實(shí)現(xiàn)分離的可能。
容量因子
隨著容量因子k的增大，分離度也隨之增加，這種影響在k值較低時(shí)非常明顯，當(dāng)k值大于10時(shí)，k值增加對(duì)分離度的影響***不再顯著，這***告誡無(wú)原則地提高k值以增大分離度是沒(méi)有意義的。增加鍵合相密度能夠提高k值；另外改變鍵合基團(tuán)類(lèi)型也能改變k值，比如在反相色譜中，隨著鍵合相碳鏈長(zhǎng)度的增加，k值逐漸增大。
分離度，指相鄰兩峰的保留時(shí)間之差與平均峰寬的比值.也叫分辨率,表示相鄰兩峰的分離程度.
R越大,表明相鄰兩組分分離越好.一般說(shuō)當(dāng)R＜1時(shí),兩峰有部分重疊；當(dāng)R=1.0時(shí),分離度可達(dá)98%；當(dāng)R=1.5時(shí),分離度可達(dá)99.7%.通常用R=1.5作為相鄰兩組分已******分離的標(biāo)志.當(dāng)R＝1時(shí),稱為4σ分離,兩峰基本分離,裸露峰面積為95.4%,內(nèi)側(cè)峰基重疊約2%.R＝1.5時(shí),稱為6σ分離,裸露峰面積為99.7%.R≥1.5稱為******分離.《中國(guó)藥典》規(guī)定R應(yīng)大于1.5.

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