Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞；A375-Cas9-574實(shí)驗(yàn)方法現(xiàn)貨直銷，免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。

細(xì)胞名稱   Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞；A375-Cas9-574實(shí)驗(yàn)方法
形態(tài)特性 上皮樣

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使A375細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。

培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；1mM丙酮酸鈉+4mML-Glutamine；400ug/ml G418

傳代方法 1:3~1:8傳代；2~3天換液1次。

傳代情況 C3

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）

STR Amelogenin：x,x；CSF1PO：11,12；D12S391：18,21；D13S317：11,11；D16S539：9,9；D18S51：12,17；D19S433：13,14.2；D21S11：29,30；D2S1338：16,24；D3S1358：15,17；D5S818：12,12；D6S1043：11,14；D7S820：9,9；D8S1179：11,14；FGA：23,23；Penta E：10,12；TH01：8,8；TPOX：8,10；vWA：16,17；

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞；A375-Cas9-574實(shí)驗(yàn)方法細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍？
取出冷凍管后， 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍， 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)， 必須注意安全， 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí)， 是否應(yīng)馬上去除DMSO？
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外， 絕大部分細(xì)胞株（包括懸浮性細(xì)胞）， 在解凍之后， 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中， 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長(zhǎng)或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基， 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基， 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)， 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來源， 所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生*的影響。來自不同物種的血清， 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞；A375-Cas9-574實(shí)驗(yàn)方法操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LS 174T [LS174T]

TLR2 Others Rat 大鼠 TLR2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

HK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞

RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元 [X464-20C]細(xì)胞 Vero(非洲綠猴腎細(xì)胞)

人十二脂腸腺癌;HuTu-80

CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
FZD4 Others Rat 大鼠 Frizzled-4 / FZD4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

CM-H024人胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

支氣管成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

Daudi細(xì)胞，人白血病細(xì)胞 小鼠腎足細(xì)胞,Mouse podocyte細(xì)胞 骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基SkMCM-prf

NCI-H157(人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

BEL-7404(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M006小鼠肺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 人成骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2
CM-H024人胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

FZD4 Others Rat 大鼠 Frizzled-4 / FZD4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

支氣管成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

Daudi細(xì)胞，人白血病細(xì)胞 小鼠腎足細(xì)胞,Mouse podocyte細(xì)胞 骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基SkMCM-prf

NCI-H157(人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

BEL-7404(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M006小鼠肺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 人成骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2
SeleniteCystiroth  進(jìn)口分裝  1-丁烷(色譜級(jí))  1-Chlorobutane  號(hào)：  109-69-3  質(zhì)量規(guī)格：  for HPLC, ≥99.5%

mTSB肉湯  進(jìn)口分裝  十五辛酸(約5mmol)[離子對(duì)色譜級(jí)]  IPC-PFFA-8 (ca. 5mmol)  號(hào)：  335-67-1  質(zhì)量規(guī)格：  用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對(duì)試劑

標(biāo)準(zhǔn)II號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊脂  進(jìn)口分裝  燦爛黃  Brilliant Yellow  號(hào)：  420703  質(zhì)量規(guī)格：
小鼠全段甲狀旁腺素elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  重樓皂苷VI（標(biāo)準(zhǔn)品）  Polyphyllin VI  號(hào)：  55916-51-3  質(zhì)量規(guī)格：  HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠去甲上腺素elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  重樓皂苷VII（標(biāo)準(zhǔn)品）  Polyphyllin VII  號(hào)：  76296-75-8  質(zhì)量規(guī)格：  HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠前列腺特異性抗原elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  *  Hyodeoxycholic acid  號(hào)：  83-49-8  質(zhì)量規(guī)格：  ≥97%,BR

小鼠前列腺素elisa試劑盒  進(jìn)口分裝  *(標(biāo)準(zhǔn)品)  Hyodeoxycholic acid  號(hào)：  83-49-8  質(zhì)量規(guī)格：  含量測(cè)定
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞；A375-Cas9-574實(shí)驗(yàn)方法骨堿性磷酸酶  進(jìn)口分裝   拉沙里菌素  英文名稱：  Lachari bacterium  號(hào)：  25999-20-6  分子式：  612.77  分子量：   C34H53NaO8

細(xì)胞分泌蛋白  進(jìn)口分裝   無花果蛋白酶  英文名稱：  Fig protease  號(hào)：  819  分子式：    分子量：

趨化因子受體5  進(jìn)口分裝   薄荷  英文名稱：  Mint  號(hào)：  10458-14-7  分子式：  154.25  分子量：   C10H18O

肌酐  進(jìn)口分裝   己唑醇  英文名稱：  F, f  號(hào)：  79983-71-4  分子式：  314.21  分子量：   C14H17Cl2N3O