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細(xì)胞凋亡檢測(cè)分析的總體原則

時(shí)間:2017/10/26閱讀:172
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因?yàn)?strong>細(xì)胞凋亡檢測(cè)是多因素、多通路參與的過(guò)程,不能根據(jù)單一指標(biāo)來(lái)判斷調(diào)亡;所以需進(jìn)行多指標(biāo)同時(shí)檢測(cè)。
由于凋亡細(xì)胞不同時(shí)間出現(xiàn)的凋亡事件不同;而每個(gè)指征維持有一段,所以需要在不同的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行采樣,以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
實(shí)驗(yàn)需要設(shè)定陽(yáng)性和陰性對(duì)照,避免出現(xiàn)假陽(yáng)性或者假陰性
根據(jù)實(shí)驗(yàn)對(duì)象(材料)的具體情況、設(shè)備配套等選擇可行的方案
線粒體膜電位檢測(cè):使用一種陽(yáng)離子染料(JC-1),該染料在正常細(xì)胞內(nèi)聚集在線粒體內(nèi),形成多聚體,發(fā)鮮紅色熒光;而在凋亡細(xì)胞內(nèi),由于線粒體膜電位的破壞,不能進(jìn)入線粒體內(nèi),以單體的形式存在于胞質(zhì)內(nèi)發(fā)綠色熒光。因此,根據(jù)紅綠熒光可以方便地區(qū)分正常和凋亡細(xì)胞。利用熒光顯微鏡,激光共聚焦顯微鏡或流式細(xì)胞儀可清楚地分辨這兩種不同的熒光信號(hào)。
*的檢測(cè):*(cytochrome c )位于線粒體內(nèi)膜和外膜之間,在外界凋亡刺激物的作用下,可以從線粒體釋放到胞質(zhì)內(nèi),并與胞質(zhì)中的Apaf-1結(jié)合。*/Apaf-1復(fù)合物激活caspase-9,即而激活caspase-3及其下游的caspases,啟動(dòng)凋亡過(guò)程。細(xì)胞凋亡檢測(cè)從細(xì)胞質(zhì)中分離富線粒體的組分,然后用試劑盒的* 抗體,通過(guò)Fluorescent、Western Blot方法檢測(cè)* 從線粒體到細(xì)胞質(zhì)的釋放。
28721-07-5     Oxcarbazepine     100mg    *標(biāo)準(zhǔn)品
604-75-1     Oxazepam CIV    200mg    *標(biāo)準(zhǔn)品
21256-18-8     Oxaprozin    200mg    *標(biāo)準(zhǔn)品
53-39-4     Oxandrolone CIII    50mg    氧雄龍標(biāo)準(zhǔn)品
61825-94-3     Oxaliplatin     125mg    *對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)品
7240-38-2     Oxacillin Sodium     200mg    *標(biāo)準(zhǔn)品
88-19-7     o-Toluenesulfonamide     200mg    鄰甲苯磺酰胺標(biāo)準(zhǔn)品
    Oseltamivir Related Compound A    10mg    奧塞米韋相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
204255-11-8     Oseltamivir Phosphate    200mg    磷酸奧斯他韋標(biāo)準(zhǔn)品
4682-36-4     Orphenadrine Citrate     200mg    枸櫞酸奧芬那君標(biāo)準(zhǔn)品
96829-58-2     Orlistat     200mg    *標(biāo)準(zhǔn)品
細(xì)胞凋亡檢測(cè)

 

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