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JC-10線粒體膜電位檢測試劑盒50T使用說明書

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更新時間:2017-07-03 13:31:31瀏覽次數(shù):251次

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JC-10線粒體膜電位檢測試劑盒50T使用說明書儲存條件: 2-8°C保存。 開蓋后組份按要求條件保存。

有效期:一年。

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JC-10線粒體膜電位檢測試劑盒50T使用說明書實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
    把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
JC-10線粒體膜電位檢測試劑盒50T使用說明書注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
枳Poncirus trifoliata(L.)Raf. Neohesperidin 新* 13241-33-3 C28H34O15 ≥98%

肉減L-ccrnitinq241-12-120mg

黃芩Scularia baicalesis 2',5,6',7-Tetraacetoxyflavanone 2',5,6',7-四乙酰氧基黃烷同 80604-17-7 C23H20O10 單元素錫溶液成分分析標準物質080579

檢查用3,5-二安基-6-錄吡嗪-2-羧酸甲酯100311-200201常溫,避光50mg

Perpxen*標準品58-39-9 200mg
(R型)人參皂苷Rh2 Ginsenoside Rh2 (≥98%,HPLC) 78214-33-2 20MG 標準品

背楓Buddleja asiatica 5-輕基-2-吡咯烷同 62312-55-4 C4H7NO2 ≥95% 膽酸甲酯0 590-100

對照品*100466-200401HPLC法含量測定用

二類殘留溶劑-標準品1.2ml×3ampules二類殘留溶劑-標準品

小葉藤黃Garcinia cowa Cotoin 柯托苷 479-21-0 C14H12O4 ≥98%
絡塞琳 rowenin 分 子 量:428.4300 編號:84954-93-8 分子式:C20H28O10 絡塞琳--(rowenin)的詳細信息 操作與貯存:

紫珠Callicarpa giraldiana Stigmasta-4,25-dien-3-one 豆甾-4,25-二烯-3-同 848669-08-9 C29H46O 番茄紅素(5915

金諾芬100272-常溫,避光50mg

扶化牙粉:扶化亞錫-二氧化硅標準品4oz

矮楊梅Myrica nana Myricanol 楊梅醇 33606-81-4 C21H26O5 ≥98.5%
2-Arachidonoyl Glycerol-d8 (100 ug)     5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic-5,6,8,9,11,12,14,15-d8 acid, 2-glyceryl ester; 2-AG-d8; 2-Arachidonoyl Glycerol-d8

CMP-Sialic Acid (wo7ium salt) (5 mg)     CMP-Neu5Ac; N-acetyl-2-(xy7nogen 5’-cytidylate)-β-neuneminic acid, monowo7ium salt

trFluor Tb-標記鏈霉親和素偶聯(lián)物     trFluor Tb-streptavidin conjugate

Benocyclidine-d10 (5 mg)     1-(1-benzo[b]thien-2-ylcyclohexyl)-2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-d10-pipeni7ine; BCP-d10|Benzothiopxenylcyclohexylpipeni7ine-d10|BTCP-d10|GK 13-d1Benocyclidine-d10

Linoleoyl Ethanolamide (50 mg)     N-(2-xy7noxyetxyl)-9Z,12Z-octadecadienamide; Linoleoyl Ethanolamide

1-[(4-chloropxenyl)metxyl]-2-(pyrrolidin     Clemizole
Glucagon (19-29), bovine, human, porcineAla-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr

Z-Ala-Ala-Leu-pNAZ-Ala-Ala-Leu-pNA

[Lys0] g-1-MSH, amideLys-Tyr-Val-Met-Gly-His-Phe-Arg-Trp-Asp-Arg-Phe-NH2

Biotin-Atrial Natriuretic Peptide (1-28), human, porcinepiotin-Ser-Leu-Arg-Arg-Ser-Ser-Cys-Phe-Gly-Gly-Arg-Met-Asp-Arg-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Leu-Gly-Cys-Asn-Ser-Phe-Arg-Tyr (Disulfide bridge Cys7-Cys23)

Osteocalcin (1-49) (human)Tyr-Leu-Tyr-Gln-Trp-Leu-Gly-Ala-Pro-Val-Pro-Tyr-Pro-Asp-Pro-Leu-Gla-Pro-Arg-Arg-Gla-Val-Cys-Gla-Leu-Asn-Pro-Asp-Cys-Asp-Glu-Leu-Ala-Asp-His-Ile-Gly-Phe-Gln-Glu-Ala-Tyr-Arg-Arg-Phe-Tyr-Gly-Pro-Val (Disulfide bridge: Cys23-Cys29)
JC-10線粒體膜電位檢測試劑盒50T使用說明書甲基叔丁基醚tert-Butyl metxyl etxenCP500ml

CA1271-500mg5''腺苷二磷酸二鈉鹽(ADP)16178-48-6500mg0

M0375-500GMaleic acid 馬來酸 (順丁稀二酸)110-16-7500g

Relax-ISO Blood DNA Kit I50ml(血量)

Isetxionic acid wo7ium salt100g

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