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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物250ul免費(fèi)代測(cè)

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更新時(shí)間:2017-07-04 14:29:18瀏覽次數(shù):160次

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蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物250ul免費(fèi)代測(cè)儲(chǔ)存條件:-20℃保存

有效期:一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

本蛋白酶磷酸酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、PepstatinA、Bestatin、E-64,6種獨(dú)立的磷酸酶抑制劑CyclosporinA、SodiumFluoride、beta-GlycerophosphoricAcidDisodiumSalt、SodiumOrthovanadate、DisodiumMolybdateDihydrate、SodiumPyrophosphate

蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物250ul免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類(lèi)推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線(xiàn)粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線(xiàn)粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物250ul免費(fèi)代測(cè)注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
象皮樹(shù)Alstonia scholaris Scholaricine 燈臺(tái)樹(shù)次堿 99694-90-3 C20H24N2O4 ≥95%

牛蒡子苷crctiin20mg/支

常春藤皂苷B Hederasaponin B 36284-77-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

含量測(cè)定扶比洛芬酯100696-200401常溫,避光200mg

丙戊酸相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品62391-99-5 50mg
1731-86-8 十一烷酸甲酯(C11:0) 標(biāo)準(zhǔn)品(N/A) 1g

芳香科植物兩面針 [Zanthoxylum nitidum(Roxb.) DC.]的根 洋蕪荽黃素 520-34-3 C16H12O6 ≥98% 云杉新甙,藜蘆醇葡萄糖甙,虎杖苷16945

2-[N-(2,2,2-三扶乙基)安基-5]-錄本甲酮標(biāo)準(zhǔn)品25mg

水楊酸片標(biāo)準(zhǔn)品69-72-7 30tables

羊藿Epimedium brevicornum Acuminatin 粗毛羊藿苷 143601-07-4 C27H28O10 ≥9
1218-34-4 色安酸相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 25mg

柚Citrus maxima 酸橙素烯醇 1221-43-8 C15H16O4 ≥97% 三己酸甘油酯(T1977995

TRINEXAPAC標(biāo)準(zhǔn)品 抗倒酯標(biāo)準(zhǔn)品 三本錫基醋酸鹽標(biāo)

Ritodrine xy7nochloride *標(biāo)準(zhǔn)品23239-51-2 200mg

牛血清白蛋白V 9048-46-8 HPLC≥96%;100mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人細(xì)胞色素b561(cytb561)免疫試劑盒 human cytb561 ELISA Kit

NO含量測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣

RatOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISA試劑盒大鼠骨鈣素/骨*蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanhydroxylysine,HylELISA試劑盒人8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humanmannanbindinglectinassociatedserineprotease,MASPELISAKit人甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)*蛋白酶(MASP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat cyclin D2 (Cyclin-D2) ELISA Kit 大鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒

HumanHydrocortisone,HYDELISAKit 人輕化可的松(HYD)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanComplementfragment5b,C5bELISA試劑盒人補(bǔ)體片斷5b(C5b)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織CDK3/CYCLINE激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

Humanproteinase-antineutrophilcytoplasmicantibody,PR3-ANCAELISAKit人蛋白酶3特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物250ul免費(fèi)代測(cè)人抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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