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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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細胞裂解液100ml使用說明書

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更新時間:2017-07-04 14:40:58瀏覽次數(shù):528次

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公司供應(yīng)的細胞裂解液100ml使用說明書品種類齊全,檢測效果好,質(zhì)量保證,歡迎廣大科研用戶!

產(chǎn)品名稱:細胞裂解液100ml使用說明書
儲存條件:2-8℃保存。

有效期:一年。

產(chǎn)品簡介:

組織細胞蛋白裂解液是一種在非變性條件下裂解細胞和組織的裂解液。能裂解細胞并充分釋放胞漿蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。裂解蛋白產(chǎn)物大限度地保留了蛋白的特性和功能。本裂解液裂解的細胞和組織樣本,可以用于PAGE,Western,免疫沉淀和免疫共沉淀等。

細胞裂解液100ml使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
細胞裂解液100ml使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細胞裂解液100ml使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
狼牙刺Sophora viciifolia Spiradine F 繡線菊堿 F 21040-64-2 C24H33NO4 ≥95%

*Xylitol20mg/支

根皮素;三輕本酚丙同; 2',4',6'-三輕基-3-(4-輕基本基)本丙同; 根皮酸本三酚一酯 Phloretin 60-82-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

檢查用*雜質(zhì)B100773-200401常溫,避光20mg

本妥英標準品57-41-0 200mg
202409-33-4 依托考昔標準品 200mg

茯苓醋Pachymicacid9070-9-6HPLC≥98%,5mg/支

30-xy7noxylup-20(29)-en-3-one 30-輕基羽扇-20(29)-烯-3-同 72944-06-0

Pyran Pamoate 雙羥酸噻嘧啶標準品22204-24-6 500mg雙羥酸噻嘧啶標準品

14-xy7noxy sprengeri 11110 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
通光散Marsdenia tenacissima Tenacigenin B 通光藤甙元乙 80508-42-5 C21H32O5 ≥98%

異夏佛塔苷Isoschcftosidq201-9-010mg

綠原酸 Chlorogenic acid 327-97-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

對照品米諾環(huán)素130514-200401HPLC法含量測定

白麻苷;槲皮素-3-O-槐糖苷 Quercetin-3-O-sophoroside 18609-17-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
大鼠*(FA)ELISA試劑盒 ,英文名: FA ELISA Kit

人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)ELISA檢測試劑盒Humansystemiclupuserythematosus,SLEELISAKit 96T/48T

大鼠U型肌酸激酶,線粒體(CKMT1A)免疫試劑盒 Rat Creatine kinase U-type, mitochondrial,CKMT1A ELISA kit

CLIAKitforSRP(Humansignalrecognizationparticleantibody)ELISAKit人抗信號識別顆??贵w規(guī)格:48T/96T

人血液前白蛋白(prealbumin;PA)免疫比濁法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitBB-Ab人抗BB抗體規(guī)格:48T/96T
豚鼠特異性免疫球蛋白E(sIgE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human systemic lupus erythematosus (SLE) ELISA Kit 人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)ELISA試劑盒

Humantransthyretin,TTRELISAKit 人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(TTR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanc-sisELISA試劑盒人c-sisELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織EGFR激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

Humanprostacycline,PGIELISAKit人前列環(huán)素(PGI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細胞裂解液100ml使用說明書人抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人抗補體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人抗丙型肝炎病毒抗體(anti-HCV)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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