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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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植物總蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T使用說明書

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更新時(shí)間:2017-07-05 11:01:00瀏覽次數(shù):161次

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植物總蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T使用說明書儲(chǔ)存條件:蛋白提取液A 室溫保存;蛋白提取液B和蛋白酶抑制劑-20℃保存。

有效期:一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

植物蛋白提取試劑盒(雙向電泳用)可以從各種植物樣本中提取總蛋白,提取過程簡(jiǎn)單方便。該試劑盒含有蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解,為提取高質(zhì)量的蛋白提供了。提取的蛋白用于雙向電泳。

植物總蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T使用說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
植物總蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T使用說明書注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
望江南Cassia occidentalis 7,3',4'-Trixy7noxyflavone 3',4',7-三羥基黃酮 2150-11-0 C15H10O5 ≥97%

異歐前胡速ISOquropqbqforqHuSu20mg/支

3’-輕基* 3'-xy7noxy Puerarin 117076-54-5 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

含量測(cè)定內(nèi)標(biāo)用P-安基本甲異丙酯100848-200701常溫,避光50mg

原纖細(xì)* Protogracillin(p) 54848-30-5
25081-93-0 卡巴拉汀相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 15mg

* Tripterygium wilfordii Hook. f. *紅素 34157-83-0 C29H38O4 ≥98% 甲本磺丁脲;甲糖寧(T1700000

甲基流代乙酰氧肟 甲基殺草隆標(biāo)準(zhǔn)品 3-甲基一靈酸亞基

Clindamycin Phosphate*酸酯標(biāo)準(zhǔn)品24729-96-2250mg*酸酯標(biāo)準(zhǔn)品

毛蕊異黃酮苷 20633-67-4 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
980-71-2 馬來酸溴本那敏標(biāo)準(zhǔn)品 125mg

胰高血糖速GlucagonIU/19ng

Bis-5,5-nortrachelogenin 870480-56-1

*標(biāo)準(zhǔn)品(2-8℃)ea*標(biāo)準(zhǔn)品(2-8℃)

麥冬苷元-3-O-α-L-鼠李糖基- ;5mg 訂購(gòu)|咨詢
小鼠CD320分子(CD320)ELISA試劑盒 ,英文名: CD320 ELISA Kit

人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA檢測(cè)試劑盒Humandeoxypyridinoline,DPDELISAKit 96T/48T

大鼠甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)免疫試劑盒 Rat Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH ELISA kit

CLIAKitforVCL(Humanvinculin)ELISAKit人紐蛋白規(guī)格:48T/96T

免疫組化AP-BCIP/NBT底物顯色試劑盒50次

ELISAKitPGAM2人磷酸甘油酸變位酶2規(guī)格:48T/96T
兔子基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human thymosin alpha 1 (Thymosin alpha 1) ELISA Kit 人*α1(Thymosin α1)ELISA試劑盒

Human28SribosomeRNPantibody,28SrRNPELISAKit 人28S抗核糖體抗體(28SrRNP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

humaneosinophil-associatedribonucleaseAfamilymember1,EAR1ELISA試劑盒人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員1(EAR1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織PKD2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

Humanpara-aminobenzoicacid,PABAELISAKit人對(duì)氨基苯甲酸(PABA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物總蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T使用說明書人白細(xì)胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人白細(xì)胞分化抗原40配體(CD40)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人白細(xì)胞分化抗原40L配體(CD40L)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人白細(xì)胞分化抗原4(CD4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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