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細菌脂多糖(LPS)提取試劑盒100T實驗方法

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更新時間:2017-07-05 11:22:11瀏覽次數(shù):358次

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細菌脂多糖(LPS)提取試劑盒100T實驗方法公司供應(yīng)的細胞生物學(xué)試劑品種齊全,質(zhì)量保證,*,歡迎廣大科研用戶選購!

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細菌脂多糖(LPS)提取試劑盒100T實驗方法儲存條件:2-8℃保存。

有效期:一年。

產(chǎn)品簡介:

脂多糖(LPS)是革蘭氏陰性菌細胞壁外膜的主要成分,結(jié)構(gòu)很復(fù)雜、熱穩(wěn)定性*(在250℃下干熱滅菌2h才*滅活)。受LPS發(fā)現(xiàn)的歷史原因,如今LPS的概念幾乎等同于內(nèi)毒素(endotoxin)。LPS由多糖鏈和脂質(zhì)A組成,不同細菌間的多糖鏈是高度變化的,決定細菌的血清型;而脂質(zhì)A主要影響LPS的毒性作用。LPS可以引起免疫刺激的級聯(lián)反應(yīng)和機體的毒理活動,包括釋放內(nèi)毒素引起感染性休克從而導(dǎo)致末梢血管虛脫。臨床常通過檢測LPS的存在來診斷腦膜炎。

細菌脂多糖(LPS)提取試劑盒100T實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
細菌脂多糖(LPS)提取試劑盒100T實驗方法注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
可可Cocoa Theobromine 83-67-0 C7H8N4O2 ≥98%

右旋四輕巴馬汀cright-hcndqdfourxy7nogqnbcrMcrtin320-14-720mg

毛冬青皂苷甲;毛冬青皂甙甲 Ilexsaponin A1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

HPLC法含量測定*100883-200601常溫,避光100mg

靈芝酸B Ganoderic acid B 81907-61-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
298-46-4 *標準品 100mg

Hederagenin-3-O-α-L-Hederagenin-3-O-alpha-L-13320-27-HPLC≥98%;5mg/支

Linarin 蒙花苷 480-36-4

Rebaudioside A 甜菊雙糖甙A標準品58543-16-1 300mg甜菊雙糖甙A標準品

白藜蘆醇;Resveratrol 501-36-0 20mg 訂購|咨詢
水紅木Viburnum cylindricum Vibsanin C 葉含莢寧 C 74690-89-4 C25H36O5 ≥95%

野柏合減Monocrotclinq312--020mg

人參皂苷Rb1;人參皂甙Rb1 Ginsenoside Rb1 41753-43-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

標準品人胰島素140633-200302RP-HPLC法效價測定

扁蓄苷;萹蓄苷 Avicularin 572-30-5 20mg HPLC≥98% 暫無簡介
大鼠足細胞標記蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA試劑盒 ,英文名: PCX ELISA Kit

人糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA檢測試劑盒Humanglucocorticoidreceptor-α,GR-αELISAKit 96T/48T

大鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒 Rat monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,MCP-1/MCAF ELISA kit

CLIAKitforTRAIL-R1(Humantumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand1)ELISAKit人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1規(guī)格:48T/96T

羥*(HYP)高效液相色譜定量檢測試劑盒20次

ELISAKitAT人抗*規(guī)格:48T/96T
兔乙酰*受體抗體(AChRab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human fibrinogen (Fbg) ELISA Kit 人血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒

HumanCoxsackievirusIgG,CoxV-IgGELISAKit 人柯薩奇病毒IgG(CoxV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanFolicacid,FAELISA試劑盒人*(FA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織半*蛋白酶-1(PASE-1)活性比色法定量檢測試劑盒20次

HumanNeurotensin,NISAKit人神經(jīng)降壓素(NT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細菌脂多糖(LPS)提取試劑盒100T實驗方法人Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人17-類固醇(17-KS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人17羥孕(17-OHP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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