藻類蛋白提取試劑盒100T實驗方法使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱：藻類蛋白提取試劑盒100T實驗方法
儲存條件：蛋白酶抑制劑-20℃保存；蛋白提取液室溫保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

藻類蛋白提取試劑盒可以從各種藻類中提取總蛋白，包括藍藻門的原核藻類和原生生物藻類。也可用于純化蛋白的粗品制備。提取過程簡單方便。該試劑盒含有蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高質量的蛋白提供了。該試劑盒提取的蛋白具有天然活性，可用于各種下游實驗。本試劑盒提取的蛋白不可用于2D電泳。如下游實驗需要用于2D電泳，請使用其它貨號的試劑盒。

藻類蛋白提取試劑盒100T實驗方法操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
藻類蛋白提取試劑盒100T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
黃花夾竹桃Thevetia peruviana Thevetiaflavone 黃花夾竹桃黃酮 29376-68-9 C16H12O5 ≥99%

8-氧基滇屋減8-qthoxyycncconitinq20mg

?；? Taurohyodeoxycholic acid wo7ium salt hydrate 110026-03-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

含量測定*100886-200601常溫，避光100mg

千金藤啶堿 L-Stepholidine 16562-13-3
2''-O-p-反式香豆酰... Orientin 2''-O-p-trans-coumarate,HPLC... 73815-15-3 10MG 標準品

燈盞花Gerbera jamesonii 飛蓬苷 59219-76-0 C11H14O8 ≥98% 瞇達坐侖：用于系統(tǒng)適用性試驗-* psy(Y0000599

對照品鄰位甲酚100196-200302GC法含量測定用

高分子人體胰島素標準品11061-68-0 支高分子人體胰島素標準品

石菖蒲 Acorus tatarinowii Schott Asa
6363-53-7 麥芽糖標準品 500mg

氧醉椒速metxoxykawain200-6-020mg

3-IsoMangostin hydrate 3,4-二輕-5,9-二輕基-11-(3-輕基-3-甲基丁基)-10-甲氧基-2,2-二甲基-2H,12H-并[2,3-A]氧雜意-12-同 26063-96-7

本醚甲環(huán)唑 標準品 號： 0.25g

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