PA飽和水溶液(1.22%)100ml使用說明書使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
PA飽和水溶液(1.22%)100ml使用說明書操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
PA飽和水溶液(1.22%)100ml使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
BC-022(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1

LIF Others Human 人 LIF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

NCI-H205細(xì)胞，人腎上腺腺瘤細(xì)胞 牛腎細(xì)胞,MDBK (NBL-1)細(xì)胞 CL-0357HHCC(人肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

5-8F, 人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞系

HCH-c 人軟骨細(xì)胞 500,000cells 人表皮角質(zhì)細(xì)胞-HEK-a
人支氣管成纖維細(xì)胞HBF

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Texas/05/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

J774A.1 小鼠巨噬細(xì)胞

CM-H107人軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

Hep G2, 人肝癌細(xì)胞系

人癌細(xì)胞;MCF7 人角膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人角膜上皮細(xì)胞RNAHCEpiC miRNA5 μg

水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S3

SW116細(xì)胞，人大腸癌細(xì)胞 人葡萄膜黑色素細(xì)胞,UM細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;Caco-2

Hep 3B(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

AGRP Others Human 人 AgRP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒 ，英文名： GP-II ELISA Kit

人細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanCyclin-D3ELISAKit 96T/48T

駱駝天*氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)免疫試劑盒 Camel Aspartate Aminotransferase,AST ELISA kit

CLIAKitforP-Selectin(HumanP-Selectin/CD62P/GMP140)ELISAkit人P選擇素規(guī)格：48T/96T

石蠟切片總游離*菲律賓(FILIPIN)熒光直接染色試劑盒50次

ELISAKitu-T4人高敏甲狀腺素規(guī)格：48T/96T
小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Rat vitamin B12 (VB12) ELISA Kit 大鼠維生素B12(VB12)ELISA試劑盒

HumanSomatostatin,SSELISAKit 人*(SS)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

humancollectinsub-familymember11,COLEC11ELISA試劑盒人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織Akt2/PKBβ激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

HumanReceptorⅠfortheFcregionofimmunoglobulinA,FcαRⅠELISAKit*AFc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
PA飽和水溶液(1.22%)100ml使用說明書人癌抗原（CA125）ELISA試劑盒         組裝/原裝

人癌標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人硫氧還蛋白還原酶(TrxR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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