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Gomori六胺銀法尿酸鹽染色試劑盒4x50ml實驗方法

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更新時間:2017-07-07 11:40:57瀏覽次數(shù):231次

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Gomori六胺銀法尿酸鹽染色試劑盒4x50ml實驗方法注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
Gomori六胺銀法尿酸鹽染色試劑盒4x50ml實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
我司Gomori六胺銀法尿酸鹽染色試劑盒4x50ml實驗方法本著標準*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
M1(小鼠白血病細胞) 5×106cells/瓶×2

人支氣管上皮細胞RNAHBEpiC miRNA5 μg

TNFSF11 Others Human 人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 人細胞裂解液 (陽性對照)

BIU-87細胞,人膀胱癌細胞 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染了neor和LIF基因的STO細胞株,SNL細胞 CSC, 小鼠心肌細胞

CL-0440SK-MEL-1(人皮膚黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2

NHEK adult single donor Pellet 正常人類表皮角質(zhì)細胞團塊(捐獻者) > 1 mio.cells 小鼠腎小管上皮細胞MREpiC
視網(wǎng)膜色素上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

GRK6 Others Human 人 GRK6 / GPRK6 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3

SH-SY5Y細胞,神經(jīng)母細胞瘤細胞 人膽囊癌細胞,GBC-SD細胞 CL-0048Ca Ski(人上皮細胞)5×106cells/瓶×2

人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細胞株;7WCY1.0

IL32 Others Human 人 Interleukin-32 / IL-32 (isoform alpha) 人細胞裂解液 (陽性對照)
TLR2 Others Rat 大鼠 TLR2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人結(jié)直腸腺癌細胞;LS 174T [LS174T]

HK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞

RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元 [X464-20C]細胞 Vero(非洲綠猴腎細胞)

人十二脂腸腺癌;HuTu-80

CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人細胞色素C-1(CYC1)免疫試劑盒 Human cytochrome c-1,CYC1 ELISA kit

谷酸脫氫酶(GDH)測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣

RatorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISA試劑盒大鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanHydrocortisone,HYDELISA試劑盒人(HYD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanmammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit人癌標志物-CA153ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠4羥基壬烯酸(4-HNE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

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