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木瓜蛋白酶抑制劑1ml使用說明書

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更新時間:2017-07-10 11:55:38瀏覽次數(shù):152次

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木瓜蛋白酶抑制劑1ml使用說明書注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
木瓜蛋白酶抑制劑1ml使用說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
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NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽)

大鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

IGFBP2 Others Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

大鼠腎小球系膜細(xì)胞hbzy-1 Rat mesangial cell hbzy-1 DMEM(高糖)+10%FBS(或者EMEM+10%FBS)

少突膠質(zhì)前體細(xì)胞培養(yǎng)基OPCM

NCI-H1975(人肺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 神經(jīng)元細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人骨骼肌細(xì)胞HSkMC

CSF2 Others Mouse 小鼠 GM-CSF / CSF2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

新生牛眼晶體上皮細(xì)胞;NBLE

NCI-H2087細(xì)胞,人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝的NIH3T3細(xì)胞,PA317細(xì)胞 CM-R095大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

RL95-2(人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

Gibco 10725018 Keratinocyte-SFM (1X), Liquid with L-Glutamine, without Calcium Chloride 500 ml
SLC27A4 Others Human 人 SLC27A4 / FATP4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人雪旺細(xì)胞HSC

犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2)

敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21 食管癌細(xì)胞,TE-10細(xì)胞 MA-104細(xì)胞,猴腎細(xì)胞系

SK-N-SH, 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 Human

SDC1 Others Human 人 SDC1 / CD138 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
大鼠卵泡抑素(FS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人腎素(Renin)免疫試劑盒 Human renin,REN ELISA Kit

MouseGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

swinemajorhistocompatibilitycomplexⅢ,MHCⅢ/SLAⅢELISA試劑盒豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanMatrixmetalloproteinase3,MMP-3ELISA試劑盒人基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanPhospholipidaseA2,PL-A2ELISAKit人磷脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human granulocyte chemotactic protein 2 (NAP-2/CXCL7) ELISA Kit 人中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA試劑盒

HumanB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit 人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanIg-liketranscriptsReceptor,ILTsRELISA試劑盒*樣轉(zhuǎn)錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)總活性熒光定量檢測試劑盒20次

HumanLeukotrieneC4,LT-C4ELISAKit人白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
木瓜蛋白酶抑制劑1ml使用說明書大鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠肌酸激酶(CK)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠肌球蛋白輕鏈磷酸酶(MLCP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠肌球蛋白(Myosin)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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