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土壤 RNAout50 次實驗方法

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更新時間:2017-07-12 16:44:36瀏覽次數(shù):165次

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土壤 RNAout50 次實驗方法RNALOCKER 是一種在較高溫度下保存 RNA 樣品的非凍型無毒溶液,它能 迅速滲入細胞內(nèi),通過高效抑制 RNase 的活性而保存 RNA 的完整性。

土壤 RNAout50 次實驗方法存新鮮組織樣品:
1. 估計*浸沒樣品所需要 RNALOCKER 的體積(1g 組織需 10 mL) RNA。
2. 標記收集管并加入估計所需量的 RNALOCKER。
3. 以快速度將樣品剪切成厚度小于 0.5 cm 的碎塊。注: 鼠肝、腎和脾等小器官樣品和沒有蠟質(zhì)保護層的植物樣品可不需剪切而直接放入本產(chǎn)品中保存,有蠟質(zhì)保護層的植物樣品需要先將蠟表皮破壞。
土壤 RNAout50 次實驗方法詳細介紹:

土壤 RNAout50 次實驗方法特點:
RNALOCKER
是一種在較高溫度下保存 RNA 樣品的非凍型無毒溶液,它能 迅速滲入細胞內(nèi),通過高效抑制 RNase 的活性而保存 RNA 的完整性。
1. 操作簡單,將*薄浸沒在 RNALOCKER 中即可使其 RNA 不被降解。
2. 替代液氮,使樣品的保存不需液氮,干冰或-80℃冰箱,尤其適用于臨床和 野外樣品的快速和大規(guī)模采集。
3. RNA 完整,因 RNALOCKER 能迅速抑制組織中 RNA 酶的活性,故從中提取 的 RNA 的質(zhì)量跟液氮保存的樣品相比不相上下。
4. 方便運輸,處理過的樣品能在 25℃保存一周,使樣品郵寄和運輸變得容易 和便宜,有利學術(shù)合作和交流。
5. 反復凍融,經(jīng) RNALOCKER 處理的樣品可反復凍融 20 次,其間可對樣品進 行各種處理而不影響終提取的 RNA 的質(zhì)量。
6. 結(jié)果準確,RNALOCKER 進入細胞十分快速,基因表達在發(fā)生應急改變前就 得以鎖定,故 RNA 分析更能反映取樣時的真況。
7. 可比性強,RNALOCKER 能減少大規(guī)模樣品處理中的誤差,增加各次實驗數(shù) 據(jù)間的可比性,對大規(guī)?;虮磉_譜的分析尤其有用。
8. 兼容性廣,雖然處理過的樣品可以使用天澤基因的動物 RNAOUT 和 TRIzol 等試劑提取其 RNA,樣品還可直接用于組織切片,免疫學和流式細胞分析而 不影響 RNA 提取的質(zhì)量。
土壤 RNAout50 次實驗方法病毒:
1.
標記收集管。
2. 將待樣品轉(zhuǎn)移到離心管中,離心收集細胞,棄上清。注:處理含病毒的樣品(如血漿)可直接從步驟 2.4 開始。
3. 用冰浴的緩沖液洗一次。
4. 將細胞懸浮在少量緩沖液中。
5. 加入五到十倍體積的 RNALOCKER,混均; 對病毒樣品,加入兩到三倍體積的 RNALOCKER,混均。
6. 將收集管存放于溫度適當?shù)牡胤?,存放時間不能超該溫度下的長存放時間。如果要存放在-20℃或-80℃,需先在 4℃放置后再轉(zhuǎn)移到后溫度條件(將樣品轉(zhuǎn)移到-20℃或-80℃前, 需要倒棄保護液)。注: 樣品存放溫度與其長存放時間關(guān)系為如下 37℃ 一天(病毒樣品為一月) 18-25℃ 一周(病毒樣品為一月以上) 2-8℃ 一個月 -20℃和-80℃ *
7. 取出樣品,室溫下融化(-20℃或-80℃保存的樣品需先在室溫下融化)。
8. 加入一倍體積的預冷的緩沖液 (如 PBS),用常規(guī)離心法收集細胞并用緩沖液洗一次。病毒樣品可免去此步驟。
9. 細胞直接用于 RNA 的提取或其他處理。
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