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SSPE 溶液 ,20×100mL保存

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SSPE 溶液 ,20×100mL保存一般使用0.1×SSC做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。

SSPE 溶液 ,20×100mL保存詳細(xì)說明書:

SSPE 溶液 ,20×100mL保存使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實(shí)驗(yàn)前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液.
3. 37
℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時(shí)使其終濃度達(dá) 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用適當(dāng) Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時(shí),乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時(shí),請?jiān)诘?/span> 8 步之后進(jìn)行。
SSPE 溶液 ,20×100mL保存確定洗膜溫度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此條件下的洗膜溫度比 Tm 低 5-12℃,一般情況下可以在 55℃進(jìn)行洗膜。Oligo 探針可以室溫洗膜。 四、預(yù)雜交步驟 預(yù)雜交就是用不含探針的超級雜交液跟印跡膜進(jìn)行孵育,其目的是用所含 的非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物將印 跡膜上會非特異地吸附探針分子的位點(diǎn)封閉,否則這些位點(diǎn)會吸附標(biāo)記的探 針,造成高背景。
1. 將結(jié)合了靶分子的硝酸纖維素印跡膜或尼龍印跡膜浸泡于自備的 6× SSC 溶液中,使其充分濕潤。
2. 將濕潤的印跡膜置于一塑料雜交袋中(塑料袋預(yù)先封口,再剪掉一角, 留一個(gè)小口),按每平方厘米印跡膜加 0.2 mL 超級雜交液的比例沿小口 加入超級雜交液,然后用塑料封口機(jī)將口封牢。 3. 將此塑料袋浸沒入溫度設(shè)定在雜交溫度的恒溫水浴中或雜交爐中,保 溫 1-2 小時(shí),延長到 12-16 小時(shí)亦可。注意保溫過程中塑料袋應(yīng)在不停 的搖動狀態(tài)中,使超級雜交液與印跡膜充分接觸。
SSPE 溶液 ,20×100mL保存步驟:
1. 如果標(biāo)記的探針是雙鏈核酸,則需經(jīng)變性處理。具體操作是:根據(jù)探針濃 度和雜交所需探針的量計(jì)算出所需的探針體積,取出所需體積的探針到一 干凈的硅化的塑料離心管中,加入等體積的本產(chǎn)品,吹打混勻后室溫放置 5 分鐘變性后,將探針樣品放入冰浴中冷卻,加入 0.05 倍體積的自備的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等體積的自備的 0.4 M 的 HCl 溶液。 將探針樣品保存在冰浴中直至需要。如果是單鏈 DNA 或 RNA 探針,則 不需變性,直接使用。
2. 將單鏈探針或變性后的雙鏈探針加入到完成了預(yù)雜交的雜交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探針后用熱封機(jī)封口)。探針的加入量視探針標(biāo)記效率 而定,一般要求終濃度不能低于 1-2 ng/mL。如果檢測基因組中的單拷 貝基因,探針的加入量應(yīng)加大,而對于檢測克隆的基因片段,則探針的量 可減少。如果是放射性探針,應(yīng)將此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 雜交袋發(fā)生遺漏、污染工作環(huán)境。
3. 在選定的雜交溫度下繼續(xù)保溫,時(shí)間一般為 6-12 小時(shí)。 六、洗膜步驟。注意在下面的所有操作過程中,一定不要使印跡。
大鼠乙酰*受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 ,英文名: AChRab ELISA Kit

人抗Mi2抗體(anti-Mi2-Ab)ELISA檢測試劑盒Humananti-Mi2-antibodyELISAKit 96T/48T

大鼠γ干擾素受體(IFN-γR)免疫試劑盒 Rat Interferon γ Receptor,IFN-γR ELISA Kit

CLIAKitforTAbELISAKit大鼠甲狀腺素抗體規(guī)格:48T/96T

人體ras基因甲基化檢測試劑盒20次

ELISAKitLC1人抗肝細(xì)胞胞質(zhì)1型抗體規(guī)格:48T/96T
鵝白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血栓素A2合成酶(TX-A2)免疫試劑盒 Human Thromboxane-A2 Synthase(TX-A2 Synthase)ELISA Kit

人抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: TPO-Ab ELISA Kit

RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP-2ELISA試劑盒大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humangammaglutamyltranspeptidase,GGISA試劑盒人γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

Humaninterferon-inducibleprotein10,IP-10ELISAKit人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠胱天蛋白酶8(Casp-8)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human kidney injury molecule 1 (Kim-1) ELISA Kit 人腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒

humanHistamine,HISELISAKIT 人組胺(HIS)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humananti-PL7-antibodyELISA試劑盒人PL7抗體/抗蘇氨酰tRNA合成酶(PL7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測定試劑盒20次

Humantumorspecifictransplantationantigen,TSTAELISAKit人特異性移植抗原(TSTA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
15(S)-HETrE (50 ug)     15S-xy7noxy-8Z,11Z,13E-eicosatrienoic acid; 15(S)-HETrE

β-Nicotinamide Mononucleotide (10 mg)     β-NMN; 3-(aminocarbonyl)-1-(5-O-phosphono-β-D-ribofuranosyl)-pyridinium, inner salt

iFluor 594-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml     iFluor 594-streptavidin conjugate 1 mg/ml

Pentadecanoyl Ethanolamide (10 mg)     N-(2-xy7noxyetxyl)-pentadec*; Pentadecanoyl Ethanolamide

13(Z)-Docosenoic Acid (500 mg)     13Z-docosenoic acid; Erucic Acid; 13(Z)-Docosenoic Acid

D-(     Chlorampxenicol
GM-CSF (96-112)Cys-Ala-Thr-Gln-Ile-Ile-Thr-Phe-Glu-Ser-Phe-Lys-Glu-Asn-Leu-Lys-Asp

α-CGRP (31-37) (canine, mouse, rat)Asn-Val-Gly-Ser-Glu-Ala-Phe- NH2

[Met5, Lys6, Arg7] a-Neo-Endorphin (1-7)Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-Lys-Arg

Biotin-Intermedin (human)Biotin-Thr-Gln-Ala-Gln-Leu-Leu-Arg-Val-Gly-Cys-Val-Leu-Gly-Thr-Cys-Gln-Val-Gln-Asn-Leu-Ser-His-Arg-Leu-Trp-Gln-Leu-Met-Gly-Pro-Ala-Gly-Arg-Gln-Asp-Ser-Ala-Pro-Val-Asp-Pro-Ser-Ser-Pro-His-Ser-Tyr-NH2

OxytocinCys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2(Disulfide bridge:Cys1-Cys6)
SSPE 溶液 ,20×100mL保存乙基本etxyl-benzenAR500mL

CA1081S-5mg乙酰輔酶 A102029-73-25mg0

C2037-25MGCytochrome C 細(xì)胞色素 C(牛心)9007-43-625mg

TRNsol LS Reagent50ml

L-精安酸鹽酸鹽25g

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