單孢子全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次運(yùn)輸詳細(xì)說明書：

單孢子全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次運(yùn)輸產(chǎn)品及特點(diǎn)：
易錯(cuò) PCR（error-prone PCR）是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對(duì)功能的特性，在一定條件下（如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在）能夠按較高的機(jī)率引入隨機(jī)引入突變。如果有適當(dāng)?shù)倪x擇方法，則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯(cuò) PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下：本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進(jìn)行易錯(cuò) PCR 而開發(fā)，本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn)：
1. 即開即用，十分簡單方便，尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化，突變率穩(wěn)定，突變沒有趨向性。易錯(cuò) PCR 的突變率為 0.66% （±0.13%），詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單，但如果在 PCR 引物中設(shè)計(jì)位點(diǎn)，則可使產(chǎn)物克隆到表達(dá)載體，也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯(cuò) PCR（sequential error-prone PCR），只需把上一次易錯(cuò) PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯(cuò) PCR 的模板即可，使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴(kuò)增 1kb 以下的產(chǎn)物，對(duì)于 1kb 以上的產(chǎn)物，建議分段擴(kuò)增。
單孢子全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次運(yùn)輸變性溫度與時(shí)間：
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度，達(dá)不到變 性溫度就不會(huì)產(chǎn)生單鏈 DNA 模板，PCR 也就不會(huì)啟動(dòng)。變性溫度低則變性不*， DNA 雙鏈會(huì)很快復(fù)性，因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高，又會(huì)影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94℃ 20~30 秒，高溫時(shí)間應(yīng)盡量縮短，以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力， 高變性溫度不宜超過 95℃。 退火溫度與時(shí)間：退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強(qiáng)，但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
單孢子全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次運(yùn)輸DNA 擴(kuò)增效率下降；
溫度低產(chǎn)量高，但過低可造成引物與模板 錯(cuò)配，非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68℃之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度，可根據(jù)引物的（G+C）%含量進(jìn)行推測，一般實(shí)驗(yàn)中退火溫度比擴(kuò)增引 物的熔解溫度 Tm 低 5℃，退火時(shí)間一般為 30~60 秒，足以使引物與模板之間*結(jié) 合，長時(shí)間退火沒有必要。
單孢子全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次運(yùn)輸使用方法：
1. 以 30 uL 的標(biāo)準(zhǔn) PCR 反應(yīng)體系為例，如果反應(yīng)體系不是 30 uL，各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中，加入下列成分：易錯(cuò) PCR Mix, 10× 3 uL 易錯(cuò) PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板（10ng/uL） 1 uL PCR 引物(自備，10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶（5U/uL） 1 -5 U 補(bǔ)水到 30 uL
2. 按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進(jìn)行一定循環(huán)數(shù)的 PCR（循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表），然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件，一般可以先嘗試下面的 PCR 條件： PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯(cuò) PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環(huán) 30 次（見注） 72℃ 1 分鐘注：易錯(cuò) PCR 一般不需要熱啟動(dòng)，也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
2，3-dinor-6-keto Prostaglandin F1α （sodium salt） （5 mg）     6-oxo-9。alpha。，11。alpha。，15S-trihydroxy-2，3-dinor-prost-13E-en-1-oic acid， sodium salt； 2，3-dinor-6-keto PGF1α （sodium salt）； 2，3-dinor-6-keto Prostaglandin F1α （sodium salt）

Clonidine （hydrochloride） （5 g）     Catapres|Kapvay|ST 155； N-（2,6-dichlorophenyl）-4,5-dihydro-1H-imidazol-2-amine, monohydrochloride

胰蛋白胨（2.5KG）     Tryptone， Tryptic digest of casein.

XLR12 （5 mg）     （2，2，3，3-tetramethylcyclopropyl）[1-（4，4，4-trifluorobutyl）-1H-indol-3-yl]-methanone； XLR12

Hydroxymethyl Uracil （5 g）     5-（hydroxymethyl）-2，4（1H，3H）-pyrimidinedione； Hydroxymethyl Uracil

YPAC Cocktail Set （1000X）     StemBoost YPAC Cocktail Set （1000X）， Sterile-Filtered
MPO Inhibitor （1 ea）     MPO Inhibitor

*標(biāo)記單甲基化組蛋白H3K79多肽     Biotinylated Monomethyl Histone H3K79 Peptide （100 ul）

3-dodecanoyl-NBD Cholesterol （5 mg）     12-[（7-nitno-2，1，3-benzoxadiazol-4-yl）amino]-（3S，10R，13R）-3-methoxy-10，13-dimethyl-17-（（R）-6-methylheptan-2-yl）-tetradecahydro-1H-cyclopenta[α]e； 3-C12-NBD Cholesterol； 3-dodecanoyl-NBD Cholesterol

AKB48 （exempt preparation） （1 mg）     APINACA； 1-pentyl-N-tricyclo[3.3.1.13,7]dec-1-yl-1H-indazole-3-carboxamide

AM694 N-pentanoic acid metabolite-d5 （1 mg）     5-（3-（2-iodobenzoyl）-1H-indol-1-yl-2，4，5，6，7-d5）pentanoic acid； AM694 N-pentanoic acid metabolite-d5

Prostaglandin E2 FPIA Standard - Red (1 ea)     PGE2 Fluorescence Polarization Immunoassay Standard - Red, Prostaglandin E2 FPIA Standard - Red
Precoated （Goat Anti-Mouse IgG） EIA 96-Well Strip Plate （1 ea）     Precoated （Goat Anti-Mouse IgG） EIA 96-Well Strip Plate

Trimetxoprim （5 g）     Trimpex； 5-[（3,4,5-trimetxoxypxenyl）metxyl]-2,4-pyrimidinediamine

DAX-J2 IR     DAX-J2 IR

Topiramate （1 g）     2，3:4，5-bis-O-（1-metxyletxylidene）-β-D-fructopyranose 1-sulfamate； Topamax |TPM|Epitomax|McN 4853|RWJ 17021； Topiramate

R-Palmitoyl-（1-metxyl） Ethanolamide （10 mg）     N-（2-xy7noxy-1R-metxyletxyl）-hexadec*； R-1 PMA； R-Palmitoyl-（1-metxyl） Ethanolamide

N-[（1-metxyl-4-piperidinyl）metxyl]-3-[3-（trifluorometxoxy）pxenyl]imidazo[1，2-b]pyridazin-6-amine     SGI-1776
普通瓊脂斜面培養(yǎng)基(pH8.0-8.2)250g分離培養(yǎng)霍亂弧菌，*檢定用

*瓊脂基礎(chǔ) 250(g) incubation media *瓊脂基礎(chǔ) 250(g)

OXA基礎(chǔ) Oxford Agar Base 250克 單增李氏菌的選擇性分離

嗜鹽菌選擇性瓊脂250用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia嗜鹽菌選擇性瓊脂250用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))

ShigiellaBroth
四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基(TTB)250g用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)

氨芐*麥康凱瓊脂基礎(chǔ) 250(g) incubation media 氨芐*麥康凱瓊脂基礎(chǔ) 250(g)

厭氧肉肝湯 Anaerobic Beef Liver Broth 250克 供一般厭氧菌培養(yǎng)及其制備檢驗(yàn)用

戊烷脒多粘菌素B瓊脂基礎(chǔ)250用于炭疽桿菌的培養(yǎng)及初步鑒定incubationmedia戊烷脒多粘菌素B瓊脂基礎(chǔ)250用于炭疽桿菌的培養(yǎng)及初步鑒定

脫纖維羊血 50ml 每100mlHB0251中加入7ml脫纖維羊血
單孢子全基因組擴(kuò)增試劑盒30 次運(yùn)輸YGCAgar

A1培養(yǎng)基 250(g) incubation media A1培養(yǎng)基 250(g)

雙洗瓊脂平板 雙洗瓊脂平板 10塊

強(qiáng)化梭菌瓊脂250用于梭菌的分離培養(yǎng)(MERCK方法)incubationmedia強(qiáng)化梭菌瓊脂250用于梭菌的分離培養(yǎng)(MERCK方法)

3%堿性蛋白胨水 250g 用于副溶血性弧菌選擇性增菌培養(yǎng)