Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人前列腺癌細(xì)胞；PC-3-Cas9-578培養(yǎng)質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，進(jìn)口來源，保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
細(xì)胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人前列腺癌細(xì)胞；PC-3-Cas9-578培養(yǎng)
形態(tài)特性   上皮樣
生長特性  貼壁生長,在軟瓊脂中成簇生長，并可懸浮生長
特征特性   該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使PC-3細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件   F12K 10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法  1:3~1:6傳代；每周2~3次換液。　
傳代情況  C3
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養(yǎng)法（-）　
STR   Amelogenin：x,x；CSF1PO：11,11；D12S391：21,21；D13S317：11,11；D16S539：11,11；D18S51：14,15；D19S433：14,14；D21S11：29,31.2；D2S1338：18,20；D3S1358：16,16；D5S818：13,13；D6S1043：18,18；D7S820：8,11；D8S1179：13,13；FGA：24,24；Penta E：10,17；TH01：6,7；TPOX：8,9；vWA：17,17；
同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人前列腺癌細(xì)胞；PC-3-Cas9-578培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
IFNAR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

CL-0140LLC(小鼠肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HRGECL

A2780細(xì)胞，人卵巢癌細(xì)胞 鮭魚胚胎細(xì)胞,CHSE細(xì)胞 腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

BNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HAoSMC Pellet 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人無色素睫狀上皮細(xì)胞裂解物HNPCEpiCL
人星形膠質(zhì)細(xì)胞 Human

CM-R104大鼠腦膜細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

7130 人絨毛間葉成纖維細(xì)胞(HVT)( 5×105 )

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;BALB/C 3T3 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

野生型人c-kit受體細(xì)胞株;A7d

CD9 Others Human 人 CD9 / Tspan-29 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3/VP16-IL-2

人肺間充質(zhì)干細(xì)胞(肺)(HPMSC)(5×105)

CM-H136人牙周膜成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

小鼠淋巴瘤細(xì)胞;P388D1(IL-1) 小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

細(xì)胞名稱 種屬

JAM2 Others Mouse 小鼠 JAM-2 / JAM-B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
BufferedPeptoneWater

SilicateBacteriaMedium

腸球菌瓊脂(膽鹽-七葉苷-疊氮瓊脂) Enterococcus Agar(Bile Esculin Azide Agar) 250 用于腸球菌和腸道致病菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)

溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基250g/瓶用于滅菌效果檢驗(yàn)incubationmedia溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基250g/瓶用于滅菌效果檢驗(yàn)

VioletRedBileAgar
血平板(成品培養(yǎng)基)2407020個(gè)/盒用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)

3201-prf AEpiCM-prf 肺泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 3201-prf AEpiCM-prf 肺泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml

改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基 300ml/袋*10 用于藥品及生物制品霉菌無菌檢驗(yàn)

MEI培養(yǎng)基l用于一步濾膜法顯色檢測或計(jì)數(shù)水中的腸球菌

HB7035
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人前列腺癌細(xì)胞；PC-3-Cas9-578培養(yǎng)野生酵母培養(yǎng)基250g用于野生酵母計(jì)數(shù)培養(yǎng)

亞利桑那瓊脂(SA) 100(g) incubation media 亞利桑那瓊脂(SA) 100(g)

IMDM培養(yǎng)基 IMDM 10升 BR

緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)250用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MercK標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)250用于李氏菌的增菌培養(yǎng)(MercK標(biāo)準(zhǔn))

SkirrowAgarBase,Modified
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人前列腺癌細(xì)胞；PC-3-Cas9-578培養(yǎng)培養(yǎng)溫馨提示：
1）公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代，不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
2）公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對(duì)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于我們的技術(shù)條件，中心不保證其準(zhǔn)確性。
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